摘要 建立高效液相色谱仪测定盐酸雷尼替丁制剂含量的检测方法。 采用磷酸盐缓冲液与乙腈等比混合的流动相等度洗脱，于 314 nm 检测，外标法定量。 盐酸雷尼替丁质量浓度在 5～500 μg／mL 范围内与色谱峰面积线性相关，相关系数大于 0.999 9。 6 次测定结果的相对标准偏差为 0.85%，加标回收率为 (100±2)%。 该法操作简便、清洁高效、准确可靠，可用于盐酸雷尼替丁片和胶囊含量的测定。

盐酸雷尼替丁是应用广泛的治疗溃疡病的药品， H2 受体阻断剂，主治组胺诱发的胃部疾病，多用于缓解胃酸过多所致的胃痛、返酸等症状［1］。

目前检测雷尼替丁多采用紫外分光光度法［2］或液相色谱法［1,3–4］，广东省药检所建立的 HPLC 测定雷尼替丁含量的方法［5］成为雷尼替丁制剂药品质量标准［6］，其含量测定用磷酸与氢氧化钠反应配制磷酸盐缓冲液，还需调节 pH 值，并与乙腈按不同比例混合分别配制成流动相 A 和 B，以一定流速进行梯度洗脱，整个实验约需 30 min，耗时较长，效率低下。

笔者对制剂药品中雷尼替丁含量测定方法进行了改进，药典增补本中规定使用 230 nm 进行含量测定，但药品合成所用原料及副产品的杂质在此波长也有吸收［7］，所以需要梯度洗脱以实现较高的分离度。 雷尼替丁药品中的杂质在 314 nm 无吸收，在此波长下采用磷酸盐缓冲液与乙腈等比混合的流动相等度洗脱，仅需约 5 min，不仅提高了工作效率，降低对液相色谱仪的要求，而且减少了试剂使用量，降低了检验成本。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

高 效 液 相 色 谱 仪： Waters H–Class 型， 美 国Waters 公司；

紫外分光光度计： UV2501PC 型，日本岛津公司；

电子天平： XS205DU 型，瑞士梅特勒 – 托利多集团；

盐酸雷尼替丁对照品：批号为 100179–201105，按 C13H22N4O3S · HCl 计含量为 99.8%，中国药品生物制品检定所；

盐酸雷尼替丁制剂样品： （1）盐酸雷尼替丁胶囊，批号 20121201，山西昂生药业有限责任公司，（2）盐酸雷尼替丁片，批号 121203，广州欧化药业有限公司，规格均为 0.15 g ；

NaOH， KH2PO4 ：分析纯，国药集团化学试剂有限公司；

磷酸盐缓冲液： 称取 1 g KH2PO4 于 1 L 水中，溶解后用氢氧化钠溶液调节 pH 值至中性；

实验用水为电阻率不大于 18.25 MΩ · cm 的超纯水。

1.2 色谱条件

色谱柱： 反相 C18 柱 (150 mm×4.6 mm，5μm，美国 Waters 公司 )，柱温： 30℃；等度洗脱流动相：乙腈 – 磷酸盐缓冲液 （体积比为 50∶50）；流动相流速： 1 mL／min ；进样体积： 10 μL ；检测波长： 314nm，230 nm ；定量方式：峰面积外标法。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件选择

图 1 为雷尼替丁的紫外吸收光谱图，由图 1 可见，雷尼替丁在 230 nm 和 314 nm 波长处有最大吸收。

称取 12.1 mg 盐酸雷尼替丁对照品于 10 mL 容量瓶中，加入 50% 氢氧化钠溶液 100 μL 及水约 6mL，振摇使溶解，用水定容，室温放置 1 h 后取 10μL 注入液相色谱仪，进行系统适用性试验，采用梯度洗脱，230 nm 及 314 nm 双波长检测，色谱图分别如图 2，图 3 所示。

图 2 中雷尼替丁峰与杂质峰的分离度为 5.9，符合药典规定的二者分离度大于 4.0 的系统适用性要求。 图 3 表明杂质在 314 nm 处无吸收，在此波长下检测可采取等度洗脱。 另外，于 314 nm 检测色谱图基线比于 230 nm 检测更加平稳，表明雷尼替丁在314 nm 检测时受末端吸收的干扰更少，更利于准确积分。 另外由于 C18 链在水相中不易保持伸展状态，

C18 链的随机卷曲会导致组分保留值变化，造成反相色谱系统不稳定，所以流动相中有机溶剂的比例通常应不低于 5%［8］，但药典增补版为了提高分离度而使用 2% 乙腈，这可能损伤色谱柱填料。 提高有机相比例可避免这种水相过高造成的损伤。 采用体积比为 1∶1 的磷酸盐缓冲液 – 乙腈作流动相，等度洗脱，于 314 nm 检测样品，色谱图见图 4，雷尼替丁保留时间约为 3.8 min，在 5 min 内可全部洗脱出，且峰形尖锐，对称因子为 1.8。

2.2 线性方程

称取 50 mg 盐酸雷尼替丁至 50 mL 容量瓶中，用水定容作为母液，质量浓度为 1 mg／mL，用此母液配制质量浓度分别为 5，10，20，30，50，100，500μg／mL 共 7 种标准溶液，以最小二乘法将浓度与色谱峰面积进行一阶线性拟合，计算得到的曲线方程为 A=27 864.6c–9 743.4，相关系数近似为 1.000 0，表明雷尼替丁的质量浓度与色谱峰面积在 5～500μg／mL 范围内成线性关系且相关性良好。

2.3 精密度及回收率

取 20 粒雷尼替丁胶囊样品的内容物混匀，精密称取 27.4 mg 样品细粉，置于 100 mL 容量瓶中，加适量水并超声溶解后定容，按 1.2 色谱条件连续测定 6 次，测定结果见表 1。

由 表 1 可 知， 测 定 结 果 的 相 对 标 准 偏 差 为0.85%，精密度符合质控要求。分别精密量取上述样品处理液 10 mL 至 5 只50 mL 容量瓶中并编号，再依次分别精密加入 1，2，5，10，20 mL 的 1 mg／mL 的雷尼替丁标准溶液，用水定容，本底值为 40.5 μg／mL。 按 1.2 色谱条件进行测定，结果见表 2。 由表 2 可知，不同加标水平的回收率均在 （100±2）% 内，表明方法的准确度较高。

2.4 比对试验

取盐酸雷尼替丁片剂、胶囊剂样品，分别采用本法及标准方法测定雷尼替丁的含量，测定结果见表 3。 由表 3 可知，两种方法测定结果基本吻合。

3 结语

制剂中常见的杂质在 314 nm 波长下无响应，不会干扰雷尼替丁的检测，所以在此波长下可不必采用梯度洗脱以分离杂质，等度洗脱雷尼替丁约 3.8min 出峰，采用外标法定量，在 5～500 μg／mL 曲线线性范围内可方便地测定各种浓度的试样。 此法操作简便、准确可靠、清洁高效，利于保护色谱柱，可用于控制盐酸雷尼替丁制剂的质量。

参 考 文 献

［1］ 郝明，徐海燕，王璇，等 . 血浆中雷尼替丁和铋的药动学和生物等效性研究［J］. 沈阳药科大学学报，2010(10): 167–170.

［2］ 袁国文，金文丽，隆旭红，等 . 紫外 – 可见分光光度法测定盐酸雷尼替丁胶囊含量的不确定度评定［J］. 药物分析杂志，2011，31(3): 579–582.

［3］ 朱涛，杨更亮，姜明明，等 . 弱阳离子整体柱在线富集分析尿液中盐酸雷尼替丁［J］. 分析化学，2008，36(7): 895–899.

［4］ 沙吉达 . 盐酸雷尼替丁有关物质的高效液相分析法［J］. 海峡药学，2005，17(2): 48–50.

［5］ 严全鸿，罗卓 . HPLC 法测定枸橼酸铋雷尼替丁及其片剂中雷尼替丁的含量［J］. 药物分析杂志，2011，31(12): 2 249–2 251.

［6］ 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典第一增补本［M］. 北京：中国医药科技出版社，2010 ：附录 54.

［7］ 陈杰，郑子栋，李洁 . 盐酸雷尼替丁胶囊的质量分析［J］. 药物分析杂志，2010，30(11): 21 60–2 163.

［8］ 于世林 . 高效液相色谱方法及应用 ［M］ . 北京：化学工业出版社，2006: 29.

作者：马云云，王智磊（潍坊市食品药品检验检测中心，山东潍坊 261041)

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