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丽春红S染色

发布时间:2015-09-14 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:720

蛋白质(大于200纳克/条带)在粉红色的背景上呈现红色的条带。丽春红S染色不仅简单、快速,而且可逆。当印迹膜要再次用于第二种检测方法(如免疫印迹)时,这种染色方法特别有利。

材料:

印迹转移膜

丽春红S染色液:0. 5% (W/V)丽春红S ( Sigma公司),溶于1% (V/V)乙酸中。

200 limol/L NaOH/20%(V/V)乙腈

塑料盒

1) 将印迹转移膜放在一干净的塑料盒中,用水洗涤3次,每次5 min。

2)用丽春红S染色液染膜30s-1 min。

3)用水脱色数次,每次30s-1 min,当背景呈现非常浅的粉色时,停止脱色。空气干燥。如果要提取染色液(第4-6步),则不干燥膜。

4)将印迹扫描或照相,以永久保存染色的结果。也可用塑料包装膜或塑料袋覆盖在湿的印迹膜上,用铅笔或钢笔勾划出条带,以此直接在印迹膜上标记目的条带的位置。以适当的压力下压,使膜上形成永久性的压痕。

5)用200μmol/L NaOH/20% (V/V)乙腈提取蛋白质条带中的丽春红S染料,作用1 min

6)用水洗膜3次,每次5 min,然后空气干燥。

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