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DNA点突变的常见问题

发布时间:2015-09-18 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:736

问题1:选择Dual-LuciferaseR Reporter Assay检测系统是否需要对数据进行规一化处理?

Dual-Luciferase. Reporter Assay检测系统中有双遗传报告基因,一个报告基因活力的改变,与基因表达的特定实验条件相关,而另一个报告基因的组成性活力作为内对照值,使实验值规一化变得简单易行。Promega的Dual-Luciferase. Reporter Assay检测系统,在单管中测试两个荧光素酶报告基因,此两个报告基因具有兼容的化学特性、操作条件、速度、灵敏度、线性范围和仪器需要等。萤火虫和海肾荧光素酶测试的组合,与公司提供的载体相匹配,为双遗传报告基因的理想检测系统,使实验准确便捷。

问题2:在DNA点突变中,有何技巧?

在利用PCR重叠延伸法进行点突变时,两对引物PCR产物如果没有非特异性扩增,可将产物直接通过PCR产物纯化试剂盒处理,除去dNTP、离子物质,得到扩增片段。无需电泳分离目的条带后,再纯化。然后通过变性、复性、延伸就可以得到点突变的DNA片段。多点突变或缺失突变等时,可选用QuikChange Multi Site-Directed Mutagenesis Kit等试剂盒,一般一天时间就可完成突变,相对来讲省时省力。

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