1.方法原理

在酸性条件下，利用碱性染料孔雀绿与磷钼杂多酸生成绿色离子缔合物，并以聚乙烯醇稳定显色液，直接在水相用分光光度法测定正磷酸盐。其摩尔吸光系数为1×105 L/(mol·cm)。

2．干扰及消除

对于含磷2μg/50ml体系，下述离子的含量（mg): Cl- 4.2, Mn2+3.6, A13+3.0, Na+2.8,Br- 2.4, NO3- 2.0,K+，Ca2+, Cu2+, Ni2+和Zn2+ 1.2, Fe 3+ 1.0, Mg2+，NH4+ 0.6不影响测定。而100倍以上的硅，75倍以上的As3+和1/4磷含量的As5+均产生正干扰，添加2-3ml 0.5mol/L酒石酸或1-2m1 0.25mol/L柠檬酸均可有效消除磷含量350倍的硅、100倍的砷（Ⅲ）以0.5倍砷（V）的干扰。过量的掩蔽剂会产生负干扰，须加以注意。

3．方法的适用范围

本方法主要适用于湖泊、水库、江河等地表水及地下水中痕量磷（总磷、溶解性正磷酸盐和溶解性总磷）的测定。最低检出浓度为1μg/L。适用的浓度范围为0-0.3mg/L。

4．仪器

①分光光度计。

②民用压力锅，1-1.5kg/cm2。

5．试剂

①铝酸按溶液：溶解176.5g铝酸按((NH4)6Mo7O24·4H2O）于水中，并稀释至l 000m1。

②孔雀绿溶液：溶解1.12g孔雀绿（氯化物）于水中，并稀释至l 00m1。

③磷酸盐贮备液：将磷酸二氢钾（KH2PO4）于110℃干燥2h，在干燥器中放冷。称取0.2197g溶于水，定量转移入1000m1容量瓶中，加（1+1）硫酸5ml，用水稀释至标线，此溶液每毫升含50.00μg磷。

④磷酸盐标准使用溶液：吸取5.00ml磷酸盐贮备液于250ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含1.00μg磷。临用时现配。

⑤聚乙烯醇(PVA)溶液：取工业级PVA（平均聚合度500左右）1g溶于l00ml热水中，滤纸过滤后使用。

⑥显色剂：在40ml铝酸钱溶液中依次加入30m1浓硫酸和36ml孔雀绿溶液，混匀、静置30min后，经0.45μm微孔滤膜过滤。临用时现配并存放在4℃左右的冰箱内。T5％过硫酸钾溶液：溶解5g过硫酸钾于水中，并稀释至1 00ml。

⑧硫酸，分析纯。

6．步骤

(1)样品预处理

取混匀水样25.0ml于50m1具塞比色管中，加4ml 5％过硫酸钾溶液，加塞并用纱布包扎好，置于压力锅中，于120℃下消解30min，取出放冷，供水中总磷测定。

(2）标准曲线的绘制

取数支50m1具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，加水至50m1。用移液管加入5.0ml显色剂，再加入1.0m1 1 %PVA溶液，混匀。放置10min，用2cm比色皿，在620nm波长处以零浓度溶液为参比，测量吸光度。

(3）样品测定

取适量经预处理后的水样（含磷量不超过15μg)，用水稀释至标线，以下按绘制标准曲线步骤进行显色和测量，减去空白试验的吸光度，并从校准曲线上查出含磷量。

(4）空白试验

以水代替水样，按相同步骤，进行全程序空白测定。

7．计算

磷酸盐（(P, mg/L）=m/V

式中：m——由标准曲线查得的磷量（μg):

V－一水样体积（ml)。

8．精密度和准确度

七个实验室测定总磷和正磷酸盐含量分别为0.204mg/L和0.500mg/L的统一样品，室内相对标准偏差分别为2.98％和1.77%；室间相对标准偏差分别为7.34％和7.84%；加标回收率分别为98.0％±4.1％和101.0％±7.7%。五个实验室测定总磷和水溶性磷酸盐含量分别为0.008 - 1.03mg/L和0.003-0.130mg/L的湖库、江河及井水，相对标准偏差分别为1.3％-11.2％和0.8％-13.2%；加标回收率范围分别为92％-107％和83％-102%。

9．注意事项

①显色剂临用时现配并在4℃左右冰箱存放。

②过量掩蔽剂会产生负干扰。

③在测量过程中PVA的聚合度有影响，应使用同一种PVA试剂。