1．方法适用范围

本法介绍从水溶液样中或经制备后的底质水溶液中分离有机化合物的步骤。本方法也为相应测定方法所制备的提取液提出了适用的浓缩技术。在准备用各种色谱方法时，本法可应用于水不溶和水微溶的有机物的分离和浓缩。

2．方法摘要

取量好体积的样品，通常为1L，在规定的pH（见表3-6-6)下，在分液漏斗中用二氯甲烷进行逐次提取，提取物干燥、浓缩后，必要时，更换为与用于净化或测定步骤相一致的溶剂。

3．干扰及消除

参见“有机物的提取和样品的制备概述”。

4．仪器和设备

1)分液漏斗。2L，具聚四氟乙烯活塞。

2)干燥柱。20 mm内径，硬质玻璃色谱柱在底部带有硬质玻璃棉和聚四氟乙烯活塞（注意：烧结玻璃圆盘在高度污染的提取物通过之后很难脱污，可购买无烧结圆盘的柱子）。用一个小的硬质玻璃棉垫保持吸附剂。在用吸附剂装柱之前，用50 ml丙酮预先洗玻璃小垫，然后用50 ml的洗提溶液洗净。

3) K-D装置。

①浓缩管：10 ml，具刻度。磨口玻璃塞用于防止提取物的挥发。

②蒸发烧瓶：500 ml，用弹簧连接在浓缩管上。

③Snyder柱：三球常量。

④Snyder柱：二球微量。

4）沸石。溶剂提取过的，大约10/40目（碳化硅或同等物）。

5)水浴。加热用的，带同心圆圈盖。可控温度（±5℃ )。水浴应在通风橱中使用。

6）小瓶。玻璃制，2 ml容量，具聚四氟乙烯衬里的螺旋盖。

7) pH试剂。pH范围包括所要提取的pH。

8）锥形烧瓶。250 ml。

9）注射器。5 ml。

10）量筒。1 L。

5．试剂

①试剂水。试剂水定义为在欲测定化合物的方法检测限内观测不到干扰物的水。

②氢氧化钠溶液，10 mol/L。溶解40 g氢氧化钠于试剂水中，并稀释至100 ml。

③硫酸钠，粒状，无水（置于浅盘中在400℃加热4h进行纯化）。

④硫酸溶液（1：1)：慢慢地将50 ml H2SO4（比重1.84)加到50 ml试剂水中。

⑤提取或更换溶剂：二氯甲烷、己烷、2-丙醇、环己烷、己腈（农药级或相当规格）。

6．样品的采集、保存和处理

7．步骤

①用1L量筒，量取1L样品并移入分液漏斗中。加入1.0 ml代用标准至所有的样品、加标溶液和空白中。每批分析中选作加标的样品，加入1.0 ml基体加标标准。对于碱或中性一酸性分析，所加入的代用标准和基体加标化合物的量，应使其在欲分析的提取液中（假定注射1μl）的最终浓度为：每个碱或中性待测物为100 ng/pμl，每个酸性待测物为200 ng/μl。若使用凝胶渗透净化，应加2倍体积的代用标准和基体加标化合物，因为有一半的提取物由于GPC柱的载荷而损失。

②用广范围pH试纸检查样品的pH，必要时，将pH值调至用于分析提取物的具体测定方法所需的pH.

③在分液漏斗中加入60 ml二氯甲烷。

④密闭分液漏斗，用力振摇1-2 min，并间歇地排气以放出过大的压力。

注意：二氯甲烷很快地产生过大的压力；因此初次排气应在分液漏斗密闭井摇动一次后立即进行。

⑤让有机层次水相分离至少需10 min，若两层间的乳浊液界面大于溶剂层的1/3，分析者需采用机械技术来完成相分离。最佳技术依样品而定，可能包括搅拌、通过玻璃棉过滤乳浊液、离心或其它物理方法。收集溶剂提取物至锥形烧瓶中。若乳浊液不能破坏（二氯甲烷的回收率＜80％，校正二氯甲烷在水中的溶解度），转移样品、溶剂及乳浊液至一个连续萃取器的萃取室中，并按连续液一液萃取方法进行操作。

⑥用一份新的溶剂再重复萃取二次（见步骤③一⑤），合并3次溶剂提取液。

⑦若需进一步调节pH并提取，将水相的pH调节至表3-6-6所示的pH。如③-⑤所述，用60 ml二氯甲烷连续提取三次，收集并合并提取液，并适当地标明合并的提取液。

⑧若进行GC-MS分析，酸性及碱性或中性提取物可在浓缩之前合并。但在某些情况下，分别浓缩和分析酸性及碱性或中性提取物更为可取（例如，若为法规目的，必须测定低浓度的特殊酸性或碱性或中性化合物的存在与否，用分别萃取分析可能是正确的）。

⑨将10 ml浓缩管连接在500 ml蒸发烧瓶上组装成K-D浓缩器。

⑩将提取液通过装有约10cm高的无水硫酸钠干燥柱干燥。将干燥的提取液收集在K-D浓缩器中，用20-30m]的二氯甲烷洗涤含有溶剂提取物的锥形烧瓶，并将其定量地转移至柱中。

11.加一两粒干净的沸石至烧瓶中，装上一支三球Snyder柱。加大约1 ml的二氯甲烷至柱顶上以预湿Snyder柱。将K-D装置放在热水浴上（80-90℃）使浓缩管部分浸于热水之中，并使整个烧瓶的下部表面可被热蒸汽加热。按需要，调整装置的垂直位置和水温，以使其能在1-20 min内完成浓缩，在合适的蒸馏速度下，柱球中有大量液体流动，但球室不注满液体。当液体的表观体积达到1 ml时，将K-D装置从水浴上移出，让液体流下，冷却至少10 min。

12.若需要更换溶剂（如表3-6-6示）立即取下Snyder柱，加50 ml更换的溶剂，和新的沸石。重新装上Snyder柱，浓缩提取物，必要时提高水浴温度以保持正常的蒸馏。

13.取下Snyder柱，用1-2 ml二氯甲烷或更换溶剂冲洗烧瓶及其下部接头，溶剂流入浓缩管中。若硫结晶成为难题，可按硫的净化方法进行净化。

14.若在表3-6-6中表明需要进一步浓缩，则另加干净的沸石至浓缩管中，并装上二球微量的Snyder柱。加0.5 ml二氯甲烷或更换溶剂至柱顶上以预湿柱子。将K-D装置放在热水浴中以使浓缩管部分浸入热水中。按需要，调整装置的垂直位置和水温，以使在5-10 min内完成浓缩。在正常的蒸馏速度下，柱球将有大量液体流动，但球室不会注满液体。当液体表观体积达到0.5 ml时，将K-D装置从水浴中移出，并让液体流下，冷却至少10min。卸下Snyder柱，用0.2 ml的提取溶剂冲洗烧瓶及其下部接头，溶剂流入浓缩管。按表3-6-6所示，用溶剂最后体积至1.0-2.0 ml。

15.所得的提取液现在即可用各种有机分析技术来分析待测物的含量。若不立即分析提取液，盖紧浓缩管，冷冻贮存。若提取液要存放2d以上，则应将其转入一个具聚四氟乙烯密封的螺旋盖的小瓶中，并作适当地标明。

8．质量控制

①任何试剂空白或基体加标样品所用的分析方法，与实际样品所用的那些步骤完全相同。

②质量控制步骤同“有机物提取和样品制备概述”中关于提取和样品制备步骤。

9．方法性能