1. 方法原理

用二氯甲烷液一液萃取，K-D浓缩器浓缩，HPLC定量分析水中的苯胺类化合物。

2. 干扰及消除

水体中的酚类化合物对苯胺类化合物的分析检测有干扰，萃取时控制pH在10-11之间可消除干扰，其它化合物的干扰可采用硅酸镁（佛罗里硅土）净化消除。

3. 方法的适用范围

本方法可测定环境水体和工业废水中的苯胺类化合物

4．仪器

①高效液相色谱仪，具紫外检测器。

② K-D浓缩器：具lml刻度的浓缩瓶。

③分液漏斗：250m1，带聚四氟乙烯旋塞。

④硅酸镁净化柱：柱长35cm，内径12mm。称量硅酸镁3g，滴加5% (0.15g）的异丙醇并在振荡器上振荡5min。装填层析柱，先将少量玻璃棉填入玻璃层析柱的下端，用2-3m1正己烷润湿柱内壁，在小烧杯中用环己烷将硅酸镁制成匀浆，以湿法装柱，柱顶铺少量无水硫酸钠，放出柱中过量的正己烷至填料的界面以上。

⑤恒温水浴锅：温控可调节。

5．试剂

①甲醇，色谱纯。

②乙酸铵，分析纯。

③乙酸，分析纯。

④无水硫酸钠，分析纯，300℃烘4h备用。

⑤氯化钠，分析纯，300℃烘4h备用。

⑥二氯甲烷，分析纯。

⑦标准贮备溶液：称取标准试剂各100mg，分别置于l00ml容量瓶中，用甲醇定容，贮备溶液中各化合物的浓度为1000mg/L。也可以购买商品标准贮备溶液。

⑧标准中间溶液：用10m]单标线吸管取贮备溶液各10.0ml，置于l00ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，该溶液中各化合物浓度为l00mg/L。

⑨标准校准溶液：根据液相色谱紫外检测器的灵敏度及线性要求，用甲醇分别稀释中间溶液，配制成几种不同浓度的标准溶液，在2-5℃避光贮存，现用现配。

6．步骤

(1)样品预处理

取l00ml水样（地表水和地下水样取l000ml）用1 mol/L的氢氧化钠将水样的pH值调至11-12，加入5g氯化钠。将水样转入250ml的分液漏斗中，加入10ml二氯甲烷充分振摇，萃取2min，用无水硫酸钠过滤脱水，收集有机相于鸡心瓶中，重复萃取两次，合并有机相，用K-D浓缩器将萃取液浓缩至0.5m1左右，用甲醇定容至lml，待色谱分析（若样品中有杂质干扰测定，可将浓缩液经硅酸镁柱净化）。

(2）萃取液的净化

将样品移至装有活化的硅酸镁层析柱床的顶部，以适量正己烷洗净浓缩瓶并淋洗层析柱，再用甲醇淋洗层析柱，用浓缩瓶接取25m1淋洗液，在K-D浓缩器上浓缩至lml，待色谱分析用（或将浓缩液转移至自动进样器专用进样小瓶中，封口后待分析）。

(3）色谱条件

色谱柱：Zorbax ODS 250mm×4.6mm（内径）不锈钢柱。

流动相：0.05mol/L乙酸铵一乙酸缓冲液：甲醇（65：35）的混合液。流速：0.8ml/min。

紫外检测波长：285nm；进样量l0μl。

(4) HPLC测定

调试液相色谱仪，使之正常运行并能达到预期的分离效果，预热运行至获得稳定的基线；注入标准样品，记录色谱保留时间和响应值。

(5）校准曲线的绘制

分别取100mg/L的苯胺类化合物混合标样0、10、50、 100、250、500、1000μ1，用甲醇溶至lml，使标样浓度分别为0、1、5、10、25、50、100mg/L，根据HPLC测定结果绘制校准曲线。

(6）色谱图

苯胺类的色谱图

7．计算

采用标准工作溶液单点外标峰高或峰面积计算法，水样中各组分的浓度按下式计算：

Xi=Ei·Ai·V2/AE?V1

式中：Xi—一水样中组分i的浓度（mg/L) ;

Ei—一标样中组分i的浓度（mg/L) ;

AE—一标样中组分i的峰高或峰面积；

Ai一—萃取液中组分i的峰高或峰面积；

V2一一萃取液体积（ml);

V1——水样体积（ml)。

8．精密度和准确度

在水中加入五种苯胺类化合物的混合标样，进行样品预处理后，用HPLC定量分析。取染料污水样品做加标回收实验。

9．注意事项

①苯胺应为无色透明液体，如色泽变黄应重新蒸馏后使用。

②萃取水中苯胺类化合物之前，必须严格将pH调至10-11，加入适量的氯化钠有助于提高苯胺类化合物的回收率，避免严重的乳化现象的发生。

③萃取液在浓缩后的最终容积不要低于0.5m1，否则苯胺类化合物的回收率较低。