叶绿素是植物光合作用中的重要光合色素。通过测定浮游植物叶绿素，可掌握水体的初级生产力情况。在环境监测中，可将叶绿素a含量作为湖泊富营养化的指标之一。

1．水样的采集与保存

可根据工作的需要进行分层采样或混合采样。湖泊、水库采样500m]，池塘300ml,采样量视浮游植物分布量而定，若浮游植物数量较少，也可采样l000mi。采样点及采样时间同“浮游植物”。

水样采集后应放在荫凉处，避免日光直射。最好立即进行测定的预处理，如需经过一段时间（(4-48h)方可进行预处理，则应将水样保存在低温（(0-4℃）避光处。在每升水样中加入1％碳酸镁悬浊液lml，以防止酸化引起色素溶解。水样在冰冻情况下（-20℃ )最长可保存30d。

2．仪器设备

①分光光度计。

②真空泵。

③离心机。

④乙酸纤维滤膜（孔径0.45μm)。

⑤抽滤器。

⑥组织研磨器或其他细胞破碎器。

⑦碳酸镁粉末。

⑧90％丙酮。

3．试验程序

①以离心或过滤浓缩水样，在抽滤器上装好乙酸纤维滤膜。倒入定量体积的水样进行抽滤，抽滤时负压不能过大（约为50kPa)。水样抽完后，继续抽1 -2min，以减少滤膜上的水分。如需短期保存1-2d时，可放入普通冰箱冷冻，如需长期保存（30d)，则应放入低温冰箱（-20℃）保存。

②取出带有浮游植物的滤膜，在冰箱内低温干燥6-8h后放入组织研磨器中，加入少量碳酸镁粉末及2-3ml 90％丙酮，充分研磨，提取叶绿素a。用离心机（(3000-4000r/min）离心10min。将上清液倒入5ml或l0ml容量瓶中。

③再用2-3ml的90％的丙酮，继续研磨提取，离心10min，并将上清液再转入容量瓶中。重复1-2次，用90％的丙酮定容为5ml或l0ml，摇匀。

④将上清液在分光光度计上，用lcm光程的比色皿，分别读取750nm、663nm、645nm、630nm波长的吸光度，并以90％的丙酮作空白吸光度测定，对样品吸光度进行校正。

4．计算方法

叶绿素a的含量按如下公式计算：

叶绿素a（mg/m3)=(11.64×(D663-D750)-2.16×(D645-D750)+0.10×(D630-D750)·V1/V·δ

式中：V一一水样体积（L);

D一一吸光度；

V1——提取液定容后的体积（ml);

δ——比色皿光程（cm)。