滤膜法用的KF链球菌培养基中含有叠氮化钠可抑制革兰氏阴性细菌的生长，含有的2,3,5-三苯基四哇化氯(TTC）可进入链球菌菌体被还原成为红色，使滤膜上的粪链球菌落呈现红色或粉红色。计数该滤膜上的红色菌落即可推算出水中粪链球菌的数量。每一滤膜上以生长20-100个粪链球菌菌落最适于计数。滤膜上生长的红色或粉红色菌落一般皆为粪链球菌，必要时可选取一些菌落加以证实。即粪链球菌过氧化氢酶试验阴性，能在44.5℃生长，水解七叶普。滤膜法对含菌稀少的水样检测最为适合。

1．培养基

①KF链球菌琼脂培养基。

②胆汁-七叶苷-叠氮化物琼脂培养基。

2．步骤

（1)推测试验

①水样过滤：根据水质情况决定过滤水样量，过滤注意事项参见总大肠菌群测定中的有关部分。

②过滤后将滤膜置于KF链球菌琼脂培养基平板上，注意滤膜与平板之间不得有气泡，倒转平板，置37℃恒温箱中培养48h。

③粪链球菌菌落在滤膜上呈现大小不等的红色或粉红色菌落，菌落大小随细菌多少和培养时间而有变化，一般为1-2mm。

(2）证实试验

将推测阳性菌落转种于胆汁-七叶苷-叠氮化物琼脂平板上，在44℃±0.5℃下培养48h。菌落内或菌落周围呈现褐色至黑色，则为粪链球菌。对确证培养基上菌落有怀疑时，可做过氧化氢酶试验。向胆汁-七叶普-叠氮化物琼脂平板上生长的典型菌落上滴一滴过氧化氢溶液，产生氧气泡的为过氧化氢酶阳性反应菌，只有过氧化氢酶反应阴性的菌落，才是粪链球菌。

3．计数及报告结果

可用菌落计数器或放大镜计数滤膜上生长的粪链球菌菌落（其他菌落不计数），求出每l000ml水样中的粪链球菌数。