采集的样品应尽可能地代表所采的环境水体特征，应采取一切预防措施尽力保证从采样到实验室分析这段时间间隔里不受污染和水样成分不发生任何变化。

（一）采样

1. 采水容器

①采样瓶：通常采用以耐用玻璃制成的，带螺旋帽或磨口玻塞的500ml广口瓶，也可用适当大小、广口的聚乙烯塑料瓶或聚丙烯耐热塑料瓶。要求在灭菌和样品存放期间，该材料不应产生和释放出抑制细菌生存能力或促进繁殖的化学物质。螺旋帽必须配以氯丁橡胶衬垫。

②采样瓶的洗涤：一般可用加入洗涤剂的热水洗刷采样瓶，用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗1-2次。新的采样瓶必须彻底清洗，先用水和洗涤剂清洁尘埃和包装物质，再用铬酸和硫酸洗涤液洗涤，然后用稀硝酸溶液冲洗，以除去任何一重金属或铬酸盐的残留物，最后用自来水冲洗干净，再用蒸馏水淋洗。对于聚乙烯容器，可先用约1 mol/L盐酸溶液清洗，再依次用稀硝酸溶液浸泡，蒸馏水冲洗干净。

③采样瓶的灭菌：将洗涤干净的采样瓶盖好瓶塞（盖），用牛皮纸等防潮纸将瓶塞、瓶顶和瓶颈处包裹好，置干燥箱160-170℃干热灭菌2h，或用高压蒸汽灭菌器，121℃经15min灭菌。不能使用加热灭菌的塑料瓶则应浸泡在0.5％的过氧乙酸溶液中l0min或用环氧乙烷气体进行低温灭菌。聚丙烯耐热塑料瓶，可用121℃高压蒸汽灭菌15min。
灭菌后的采样瓶，两周内未使用，需重新灭菌。

2．去氯

采集加氯处理的水样时，余氯的存在会影响待测水样在采集时所指示的真正细菌含量，因此须经去氯处理。可在洗涤干净的样品瓶内，于灭菌前按500ml采样瓶加入0.3ml 10%
Na2S2O3溶液。然后盖好瓶盖（塞），如上所述的灭菌方法进行灭菌。

当被测水样含有高浓度重金属时，则须在采样瓶内，于灭菌前加入鳌合剂以减少金属毒性，采样点位置较远，须长距离运输的这类水样更为重要。可按500ml采样瓶加入lml15％的乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2 )溶液。

3．采样步骤及注意事项

①已灭菌和封包好的采样瓶，无论在什么条件下采样时，均要小心开启包装纸和瓶盖，避免瓶盖及瓶子颈部受杂菌污染，并注意在使用船只或附带的采样缆绳等附加设备采样时可能造成的污染。

②采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶子下部直接将己灭菌的带塞采样瓶插入水中，约距水面10-15cm处，拔玻塞，瓶口朝水流方向，使水样灌入瓶内然后盖上瓶塞，将采样瓶从水中取出。如果没有水流，可握住瓶子水平前推，直到充满水样为止。采好水样后，迅速盖上瓶盖和包装纸。

③采集一定深度的水样时，可使用单层采水器或深层采水器。采样时，将已灭菌的采样瓶放入采水器架内，当采水器下沉到预定深度时，扯动挂绳，打开瓶塞，待水灌满后，迅速提出水面，弃去上层水样，盖好瓶盖，并同步测定水深。

④从自来水龙头采集样品时，不要选用漏水的龙头，采水前可先将水龙头打开至最大，放水3-Smin；然后将水龙头关闭，用酒精灯火焰灼烧约3min灭菌或用70％的酒精溶液消毒水龙头及采样瓶口；再打开龙头，开足，放水l min，以充分除去水管中的滞留杂质。采水时控制水流速度，小心接入瓶内。

⑤采样时不需用水样冲洗采样瓶。采样后在瓶内要留足够的空间，一般采样量为采样瓶容量的80％左右，以便在实验室检查时，能充分振摇混合样品，获得具有代表性的样品。

⑥在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅扰；同一采样点与理化监测项目同时采样时，应先采集细菌学检验样品。

⑦在危险地点或恶劣气候条件下采样时，必须有防护措施，保证采样安全，并作好记录，以便对检验结果正确解释。

⑧采样完毕，应将采样瓶编号，作好采样记录。将采样日期、采样地点、采水深度、采样方法、样品编号、采样人及水温、气温情况等登记在记录卡上。

（二）样品保存

①各种水体，特别是地表水、污水和废水的水样，易受物理、化学或生物的作用，从采水至检验的时间间隔内会很快发生变化。因此，当水样不能及时运到实验室，或运到实验室后，不能立即进行分析时，必须采取保护措施。

②采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验。一般从取样到检验不宜超过2h,否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6h。实验室接到送检样后，应将样品立即放入冰箱，并在2h内着手检验。如果因路途遥远，送检时间超过6h者，则应考虑现场检验或采用延迟培养法。