一、分光光度计波长的校准

分光光度计在使用过程中，由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因，经常会引起刻度盘上的读数（标示值）与实际通过溶液的波长不符合的现象，因而导致仪器灵敏度降低，影响测定结果的精度，需要经常进行检验。在可见光区检验波长准确度最简便的方法是绘制错钱滤光片的吸收光谱曲线（见图2-2)。谱钦滤光片的吸收峰为528.7nm和807.7nm。如果测出的峰的最大吸收波长与仪器标示值相差士3nm以上，则需要细微调节波长刻度校正螺钉（不同型号的仪器波长读数的调整方法有所不同，应按仪器说明书进行波长调节）。如果测出的最大吸收波长与仪器波长标示值差大于±10nm,则需要重新调整钨灯灯泡位置，或检修单色器的光学系统（应由计量部门或生产厂检修，不可自己打开单色器）。

在紫外光区检验波长准确度比较实用的方法是用苯蒸气的吸收光谱曲线来检查。苯蒸气在紫外光区的特征吸收峰，利用这些吸收峰所对应波长来检查仪器波长准确度非常方便。具体做法是：在吸收池滴一滴液体苯，盖上吸收池盖，待苯挥发充满整个吸收池后，就可以测绘苯蒸气的吸收光谱。若实测结果与苯的标准光谱曲线不一致，表示仪器有波长误差，必须加以调整。

二、分光光度计吸收池配套性检验

在定量分析中，尤其是在紫外光区测定时，需要对吸收池作校准及配对工作，以消除吸收池的误差，提高测量的准确度。一般商品吸收池的光程与其标示值常有微小的误差，即使是同一厂家生产的同规格的吸收池，也不一定能够互换使用。

根据JJG178-96规定，石英吸收池220nm处装蒸馏水；在350nm处装K2Cr2O70.001mol/LHC1O4溶液；玻璃吸收池在600nm处装蒸馏水；在400nm处装K2Cr2O7溶液（浓度同上）。以一个吸收池为参比，调节τ为100％，测量其他各池的透射比，透射比的偏差小于0．5％的吸收池可配成一套。

实际工作中，可以采用下面较为简便的方法进行配套检验：用铅笔在洗净的吸收池毛面外壁编号并标注光路走向。在吸收池中分别装人测定用溶剂，以其中一个为参比，测定其他吸收池的吸光度。若测定的吸光度为零或两个吸收池吸光度相等，即为配对吸收池。若不相等，可以选出吸光度值最小的吸收池为参比，测定其他吸收池的吸光度，求出修正值。测定样品时，将待测溶液装人校正过的吸收池，测量其吸光度，所测得的吸光度减去该吸收池的修正值即为此待测液真正的吸光度。