北京普天同创生物科技有限公司
[实验器材]
1.仪器
普通冰箱,恒温水浴锅。
2.材料与试剂
细胞培养用胎牛血清(或新生牛血清),酒精棉球,标签纸,记号笔。
[操作步骤]
1.待灭活血清准备
取自-20℃或更低温度保存的瓶装血清,检查包装是否完整,记录规格批号等信息。
2.水浴准备
水浴锅应灌装足量的自来水,然后将瓶装血清放人水浴中,使水面与瓶内血清齐高或稍高。注意莫让水面浸没到试剂瓶瓶口部位。
3.融化血清、检查设定水温
接通水浴电源开关,检查设定水浴温度为56℃。
升温过程中,每隔3-5min摇晃试剂瓶以免白蛋白絮凝析出,促进血清冻融。
4.血清灭活
待水浴恒温56℃,且血清已经完全融化后,保温30min,即可灭活血清中可能存在的支原体和补体。期间,每隔3-5min摇晃试剂瓶以免白蛋白絮凝析出,并使血清的灭活温度均匀。
5.无菌分装
灭活后,及时按预计的每次使用量进行无菌分装,避免日后使用时反复冻融而损害血清中的活性物质。
加写标识,平衡到室温后转-20℃冰箱存放。
[注意事项]
1.血清融化时,可以提前18h将血清从-20℃冰箱转移到4℃冰箱,让其自然融化。
2.血清在升温融化和保温灭活过程中,务必经常摇晃试剂瓶以免白蛋白絮凝析出,影响外观和使用。使用有蛋白絮凝的血清培养细胞时,容易导致细胞生长繁殖受阻。
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