［实验器材]

1．仪器

倒置显微镜、一体式计算机、数码照相机、显微摄影系统、CO2培养箱、超净工作台、50-200μl单道微量移液器。

2．试剂与材料

台盼蓝染色液、生理盐水、酒精棉球、镊子、手术剪、载玻片、盖玻片、血细胞计数板、擦镜纸、洗耳球、肿瘤细胞培养物、新鲜洋葱、Eppendorf管、200μl微量移液器吸嘴。

[操作步骤]

1．数码摄影系统组成及其连接状态检查

数码摄影系统由YM200数码摄像机、三目倒置显微镜、方正心逸Q200一体电脑、MiE3.0图像处理软件等组成。YM200数码摄像头与倒置显微镜的三目接口连接，通过数据线与电脑USB口再连接。

注意检查上述部件之间的电源连接、数据线连接和工作状态是否正常。

2．数码摄影操作

(1)图像处理软件调用在WindowsXP操作系统中启动“MiE3.0图像处理软件”，出现MiE3.0图像处理软件窗口界面（图9-2a)。

(2)图像处理软件的基本设置然后点击“设置”，出现（图9-2b)“设置对话框”。

在该对话框中，选择“主摄像机”为YM200数码摄像机，选USB视频设备为“副摄像机”。选择“确定”退出该对话框，即有显微影像在主窗口呈现（图9-2c)。

如点击“视频会话”的播放键，则USB摄像头的视频将显现。如点击“视频会话”框上的主、副摄像机切换按钮，则此时USB摄像头的视频为主窗口（大），YM200摄像机的视频为副窗口（小）。

(3)文件格式与保存路径设置在“手动拍照”栏设定“保存格式”，其中“mypicture+1+End+.jpg”的意义和设定如下所述。若未修改默认设定，生成的照片名为“mypicture-10×001-end.jpg"，通常把“mypicture”设定为细胞材料名称，"end”设定为拍照者姓名。至于照片的文件格式，有*.jpg、*.Bmp、*.png和*.tif供选择，一般选择*.jpg。设定文件保存位置，通常保存在“C:\”盘以外的逻辑盘，一般指定特定的文件夹。

在“录像”栏设定录像文件的录制编码器以便确定文件格式，默认选择即可。设定文件保存位置，通常保存在“C:\”盘以外的逻辑盘，一般指定特定的文件夹。

(4)显微数码图像捕获对显微影像拍照时，先在“视频预览”模式下仔细调节显微镜的部件，使获得足够清晰和较好景深的视频预览图像，然后点按软件界面的“拍照”按钮，即完成拍摄（图9-3)。

对显微影像进行录像时，先在“视频预览”模式下仔细调节显微镜的部件，使获得足够清晰和较好景深的视频预览图像，然后点按软件界面的“录像”按钮，录像过程可以改变视场位置和景深情况，完成时按“停止录像”按钮即可。对于录像生成的文件名，默认是“日期一时间序号”，建议在Windows操作系统的资源管理器窗口进行修改，或在ACDSee等图像浏览器窗口内进行修改。

录像的文件名建议包括细胞材料名称十录像人姓名等。使用这些文件时，可以在显微数码图像的文件属性中可查看原始建立时间和修改时间等其他参数。