[实验器材]

1．仪器

倒置显微镜，CO2培养箱，普通冰箱，超净工作台，低速冷冻离心机，显微数码摄影系统，微量移液器。

2．材料与试剂

(1）非无菌材料酒精棉球，离心管架，血细胞计数板，记号笔，甲醇，冰醋酸，Giemsa染液，PBS溶液。

(2）无菌材料和试剂辅料镊,6孔细胞培养板，一次性培养皿，15m1离心管，长丝滴管，l0ml刻度移液管，灭菌塑料吸嘴，10%BS培养液，添加有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化液，lmol/LHCl溶液。

(3)细胞材料悬浮细胞培养物，贴壁细胞培养物。

[操作步骤]

1．将培养细胞的单细胞悬液以一定密度接种至内含盖玻片的培养皿或6孔细胞培养板的培养孔内。

2．置细胞培养箱中培养48h，使细胞贴附在盖玻片上生长。

3．取出盖玻片，按下列顺序操作：PBS漂洗3min→固定液（甲醇：冰醋酸＝3:1体积比）固定30min→Giemsa染液染色10min→自来水流水淋洗。

4．待盖玻片晾干后将其反扣在载玻片上，镜检。

5．结果计算。分裂指数＝分裂细胞数／总细胞数×100%。

[注意事项]

1．操作时动作要轻缓，以免使盖玻片上的细胞脱落。

2．细胞接种密度、培养时间由细胞的种类及生长习性决定。