悬浮细胞的传代，应在细胞到达饱和密度前进行。细胞的适宜密度一般在3×105-2×106之间。收集细胞、离心浓缩后，添加培养液的量要足够，保证细胞浓度较低，以便细胞有足够的营养支持其对数生长。如果仅单纯添加培养液稀释，细胞密度可以合适。但会因为营养缺乏致使细胞死亡。

另一方面，如果添加了太多培养液，细胞密度太低，超出了其密度低限，细胞会进入生长停滞或生长缓慢。由于细胞的饱和密度不同，所以细胞传代的间隔也不同。如果经验不足，最好每天观察、计数细胞密度。