最常见的可能原因是细胞传代时，消化过度，细胞严重受伤。如经验不足，细胞传代消化时，在显微镜下观察，至细胞变圆、脱壁，加入含血清的培养液，终止消化。其他原因包括长途运输，细胞在不适宜的温度下时间过长；培养液中营养成分消耗殆尽，没有及时换液。如果原来细胞状态较好，换液后细胞死亡，应考虑是培养液及血清的质量。最好事先已证明培养液及血清质量良好。