北京普天同创生物科技有限公司
伊犁贝母(Fritillariapallidiflora)是名贵药材伊贝母的主要植物来源之一,有清肺、化痰和散结之功效,为止咳化痰之要药。伊犁贝母产于新疆北部(伊宁、绥定和霍城等地),生于海拔1300-1700m的林下或草坡中。由于长期过度采挖,资源日趋减少并面临枯竭;伊贝母人工种植耗种量大,生长周期长、产量低,因而药源紧缺,组织培养可望作为开发名贵中药材资源的一种有效手段。对伊贝母外植体培养获得的愈伤组织和芽,分别在MS、N6、ER培养基中生长,22d后测定总生物碱和西贝母碱含量,目的在于找出伊贝母最佳组织培养条件,为工业化生产伊贝母药材及其有效成分作基础研究。
1.色谱条件
硅G-CMC-Na板(厚0.3mm,105℃活化lh);展开剂:醋酸乙酯-甲醇-浓氨试液((20:1.5:1);显色剂:改良碘化秘钾。
2.扫描条件
双波长锯齿法扫描,λS=505nm,λR=600nm,Sx=3,步进距离0.Lmm。
3.样品预处理
精密称取干燥至恒重的组织培养物干品粗粉2g,置50mL具塞瓶中,以2mL氨水(1:1)湿润后,加25mL混合溶剂(乙醚-氯仿-乙醇=25:8:2.5),超声提取30min,放置24h。精密吸取上清液15mL,置蒸发皿中,水浴蒸干,加氯仿溶解,定容至l0mL。精密吸取氯仿液1(0.5)mL,氯仿9(9.5)mL,0.00lmol/L嗅庸香草酚蓝溶液2mL,同标准曲线法操作,分别取氯仿层测吸光度,计算含量。
4.结果
准确吸取供试品溶液和对照品溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,展开,取出晾干,均匀喷以薄层显色用改良碘化秘钾试液,待斑点清楚后(橙红色),用干净玻璃板盖其表面,用透明胶纸将玻璃板四周封严。以上述条件扫描测定,根据峰面积外标法计算含量。结果表明,芽中总生物碱和西贝母碱含量明显高于愈伤组织,两者之间有极显著差异(P<0.01),其中ER培养基中两者含量最高。芽中总生物碱和西贝母碱含量比药材中两者含量均高(伊贝母鳞茎中总生物碱和西贝母碱含量分别为0.14%和0.04%),有一定的开发价值。
通话对您免费,请放心接听
温馨提示:
1.手机直接输入,座机前请加区号 如18601949136,010-58103629
2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听
3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听
登录后才可以评论