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薄层色谱扫描法快速检测乌头碱中毒

发布时间:2016-03-09 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1149

乌头属毛蓑科植物,其有效成分主要为剧毒的双醋型生物碱,其中以乌头碱(aconites)、新乌头碱(new-aconites)和次乌头碱(hypo-aconites)为主。现代药理学研究证明,乌头具有镇痛、消炎、麻醉、降压等作用,但毒性强,其致死量为3-5mg,从染毒至死亡只需8min至4h。由于乌头碱毒性强,中毒量与治疗量接近,因个体差异或炮制原因等引起的中毒死亡时有发生。乌头碱极其容易水解,且在体内代谢非常迅速,在检材保存或提取过程中容易分解,给乌头碱中毒的法医学鉴定带来一定的难度。为此,针对乌头属植物含有的乌头碱、新乌头碱和次乌头碱3种主要毒性成分,建立了快速检测乌头属植物中毒薄层色谱扫描方法。

1.仪器和薄层色谱条件

CS-930薄层色谱扫描仪(日本岛津);薄层板GF25420cm×20cm×0.25mm(烟台大学);展开剂:环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(8:1:1),饱和上行展开5-7cm;色谱扫描λ1=270nm,λ2=300nm,Sx=3,锯齿形扫描,记录斑点扫描面积。

2.检材提取方法

待测血液1mL加5mL乙醚,振荡混匀后加(NH)4SO4固体0.8g,加10%氨水调pH到10,振荡混匀,3000r/min,离心5min,分出有机层,5mL乙醚重复提取1次,合并两次提取液,40℃水浴氮气流下挥至8mL,乙醚液中加入0.lmol/L盐酸1mL,混合15s,静置10min,弃去乙醚层,残液加1mL二氯甲烷,1000氨水0.3mL,混合los后3000r/min,离心10min,分出有机层,氮气流下挥干,残渣用20μL无水乙醇定容,l0μL点样,按上述展开剂展开,扫描检测。心、肺、肝、肾等待测检材各lg,加水2mL匀浆,其余同血液提取。

3结果

以上述条件扫描测定,测得乌头碱线性范围为1-32μg/mL,新乌头碱与次乌头碱均为4-28μg/mL,最小检出浓度0.lμg/mL。该薄层色谱扫描法快速、简便,定性定量准确,可用于乌头碱中毒的快速诊断和乌头碱中毒致死的法医学鉴定。

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