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微生物的染色

发布时间:2016-03-22 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:447

一、微生物的简单染色

简单染色包括涂布、干燥、固定、染色、冲洗和镜检等环节,具体操作过程为:取洁净的载片一张,将其在火焰上微微加热,除去上面的油脂,冷却,在中央部位滴加一小滴无菌水,用接种环在火焰旁从斜面上挑取少量菌体与水混合后,涂成直径lcm左右的均匀薄层;待其自然干燥后,在微火上通过3-4次使其固定;然后在涂片处滴加草酸铵结晶紫溶液1-2滴,染色lmin后,倾去染液,用水轻轻冲洗,并用吸水纸轻轻吸去载片上的水分;最后用生物显微镜进行镜检。

二、微生物的革兰染色

完成涂布、干燥、固定3个环节后,用草酸钱结晶紫染色lmin,用水冲洗;再滴加革兰碘液冲去残水,并用碘液覆盖媒染lmin,用水冲去碘液;斜置载片于一烧杯上,滴加95%乙醇,并轻轻摇动载片,至乙醇液不呈现紫色时为止,立即用水冲净乙醇并用滤纸轻轻吸干;用番红染液复染lmin,水洗;吸干并镜检。

三、微生物的抗酸染色

抗酸染色通常是鉴别分枝杆菌属的染色法。分枝杆菌属其菌体中含有分枝菌酸,用普通染色法不被着色,需在加热条件下与石炭酸复红牢固结合形成复合物,而且用酸性乙醇处理不能使其脱色。

由不同颜色差别对比可知,经抗酸染色后,草分枝杆菌细胞内含有枝菌酸,而其余4种微生物不含枝菌酸。

四、微生物的芽孢染色

细菌的芽孢壁结构比营养细胞的细胞壁结构要复杂,而且致密,透性低,着色和脱色都比营养细胞困难。因此,一般采用碱性染料并在微火上加热,或延长染色时间,使菌体和芽孢都同时染上色后,再用蒸馏水冲洗,并用另一种对比鲜明的染料使菌体着色,如此可以在显微镜下明显区分芽孢和营养体的形态。

可以观察到,苦味诺卡菌、沟戈登菌和草分枝杆菌无芽孢,而胶质芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌有芽袍,其芽孢主要呈现在末端,显微镜下,芽孢呈现浅色微透明,营养体呈现深色。

五、微生物的荚膜染色
荚膜是某些细菌细胞壁外存在的一层胶状黏液性物质,与染料亲和力低,一般采用复染色的方法,使背景与菌体之间形成一透明区,将菌体衬托出来便于观察分辨。

可以观察到,在5种微生物中,只有胶质芽孢杆菌体呈现荚膜,胶质芽孢杆菌体内部为深色,外部有一大的透明圈,即为其肥厚荚膜,而其他4种微生物均无此现象。

六、工业废菌的脂肪粒和肝糖粒染色

工业废菌经脂肪粒染色染色后,脂肪粒呈深色,分布于菌体周围,细胞质居于菌体内部;工业废菌经肝糖粒染色染色后,菌体内部的细胞质中存在部分肝糖粒。

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