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培养基的制备

发布时间:2016-04-12 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:708

人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,叫培养基,其中含有碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等,以提供微生物生命活动所需的能量、合成菌体和代谢产物的原料,及调节代谢活动的正常进行。培养基除了要满足所需要的各种营养条件外,还应保证微生物所需要的其他生活条件,如适宜的酸碱度和渗透压等。因此,配制培养基时,还应根据各种微生物的特点调节适宜的pH值。

由于不同种类的微生物所需营养成分不尽相同,所以培养基种类很多。同时。即使是同一种微生物,由于实验目的不同,所采用的培养基的成分也不完全相同。根据培养基的使用、营养物来源以及物理状态,可以分成许多不同类型。

根据培养基的特殊用途,可将培养基分成基础培养基、加富培养基、选择培养基、鉴别培养基等。

①基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基。

②加富培养基:在普通培养基上加入其他营养物质,用以培养某种或某类营养要求苛刻的一样微生物。

③选择培养基:根据某种或某一类微生物的特殊营养需求或对一某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基利用这种培养基可以将某种或某类微生

从混杂的微生物群体中分离出来。比如,我们在培养基中加人青霉素或者四环素等抗生素(生长抑制剂,抑制细菌和放线菌生长),可以分离酵母菌和霉菌;通过在培养基中加人结晶紫或提高培养基中氯化钠的浓度(7.5%)。可以从混杂的微生物群体中分别分离出革兰氏阴性菌或葡萄球菌;加孔雀石绿可以分离出革兰氏阳性菌。

④鉴别培养基:在普通培养基内加人某种试剂或化学药品,使得某种微生物在这个培养基上生长后,可以产生某种代谢产物,这种代谢产物可以与培养基中的特定试剂或化学药品起反应,产生某种明显的特征性变化。根据这种特点来区分微生物。如伊红一美蓝培养基是一种鉴别培养基,常用于检查乳制品和饮用水中是否含有致病性的肠道细菌。

为了保证培养微生物的纯净,需要对培养基进行灭菌。除特殊情况外,培养基的灭菌均采用高压蒸气灭菌法。此法是将待灭菌物品放在高压蒸气灭菌锅内,利用高压时水的沸点上升,从而造成蒸气温度升高,由此产生高温达到杀灭杂菌的目的。

用高压蒸气对培养基进行灭菌时必须根据培养基的种类、容器的大小及数量采用不同的温度及时间。一般少量分装的基础培养基通常为1210C 15- -20min灭菌。如盛装培养基的容器较大,则应适当增加其灭菌的温度和时间。含糖培养基.一般采用1150C 20--30min灭菌,以免糖类因高热而分解。由于高压蒸气灭菌是通过提高蒸气压力而使其升高温度以杀死微生物,所以加压前应尽量排净锅内的空气。

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