(1）测定原理

因为粪大肠菌群与大肠菌群最大的区别就是发酵温度的差异，因此按照大肠菌群的测定方法，在45℃的条件下培养就可以能发酵乳糖产酸产气就可以判定为粪大肠菌群阳性。

(2）操作步骤

样品的稀释同大肠菌群测定的国标法。见图3-8 。

①初发酵试验：每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白陈(LST)肉汤，每管接种1mL（如接种量需要超过1mL，则用双料LST肉汤），(36±1)℃培养（24±2)h，观察倒管内是否有气泡产生，24h产气者进行复发酵试验；如未产气则继续培养至（(48±2)h。记录在24h和48h内产气的LST肉汤管数。书产气者为粪大肠菌群阴性，产气者则进行复发酵试验。

如采用多个稀释度，最终确定最适的三个连续稀释度，方法参见表3-2.

②复发酵试验：用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于预先升温至44. 5℃的EC肉汤管中。将所有接种的EC肉汤管放入带盖的（44. 5±0. 2 )℃恒温水浴箱内，培养（(24±2)h，水浴箱的水面应高于肉汤培养基液面；记录EC肉汤管的产气情况。产气管为粪大肠菌群阳性，不产气为粪大肠菌群阴性。定期以已知为44. 5℃产气阳性的大肠埃希氏菌类和44. 5℃不产气的产气肠杆菌或其他大肠菌群细菌作阳性和阴性对照。

③粪大肠菌群MPN计数的报告：根据证实为粪大肠菌群的阳性管数，查粪大肠菌群最可能数（MPN）检索表（同附表1)，报告每克（每毫升）粪大肠菌群的MPN值。

另外，在10^-1——10^-5五个连续稀释度中确定最适的三个连续稀释度按如下方法操作。

①有一个以上的稀释度3管均为阳性。选择3管都是阳性结果的最高稀释度及其相连的两个更高稀释度（见表3-2例子a, b)；在未选择的较高稀释度中还有阳性结果时，则顺次下移到下一个更高三个连续稀释度（见表3-2例子c）；如果中间有某个稀释度没有阳性结果，但更高稀释度有阳性结果，则将此阳性结果加到前一稀释度，进而确定三个连续稀释度（见表3-2例子d)；如果不能按照这个原则找到三个合适的稀释度，则选择前一个较低的稀释度（见表3-2例子e) .

②没有任何一个稀释度3管均为阳性。如果没有一个稀释度的3管均为阳性，则选择三个最低稀释度（见表3-2例子f)；如果在更高的没有被选择的稀释度还有阳性结果，将此阳性结果加到选择的最高稀释度，进而确定三个连续稀释度（见表3-2例子g) .