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生物毒性监测技术(一)

发布时间:2016-07-02 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1082

目前,突发性污染事故及水质突变现象时有发生,且呈现出明显的增加趋势,水质突发性污染事故直接危害生活饮水和城市集中供水的安全,并对水生态系统造成很大的冲击。常规的理化监测能定量分析污染物中主要成分的含量,但不足以直接、全面地反映水污染状况及各种有毒物质对环境的综合影响。而生物监测可以综合多种有毒物质的相互作用,判定有毒物质的质量浓度和生物效应之间的直接关系,为水质的监测和综合评价提供科学依据,因而得到了迅速发展。它利用活体生物在水质变化或污染时的行为生态学改变,对多种有毒物响应并能做出综合评价,可作为先导进行预警,反映水质毒性变化。

生物毒性检测方法包括急性毒性试验(acutetoxicitytest)、慢性毒性试验(chronictoxicitytest)和遗传毒性试验(genetictoxicity)。急性毒性试验是一种使受试生物群体在短时期(一般为24~96h)内产生一定死亡数量或其它反应的毒性试验。其目的在于测试某种毒物或废水对某些水生生物的致死浓度范围,预测和预防毒物对受纳水体中生物的急性伤害。其毒性的强弱用半数致死浓度(LC5o)表示,即该毒物在限定时间内使50%的受试生物个体死亡的浓度。慢性毒性试验指水生生物长时间(几个月至几年)暴露在低浓度毒物下所产生的可观察的生物效应。其目的是观察毒物与生物反应之间的关系,从而估算安全浓度或最大容许浓度(MATC)。遗传毒性试验主要研究生物体接触外源化学物质所产生DNA直接损伤或基因和染色体改变的效应,一般主要包括环境物质对生物体健康的致畸、致癌、致突变作用。

一、鱼类急性毒性试验

鱼类是水生食物链的重要环节,对水环境的变化十分敏感,当水体中有毒物质达到一定质量浓度时,就会引起一系列中毒反应。通过鱼类毒性试验可以评价受试物对水生生物可能产生的影响,以短期暴露效应表明受试物的毒害性,因此在人为控制的条件下所进行的各种鱼类毒性试验,不仅可用于化学品毒性测定、水体污染程度检测、废水及其处理效果检查,而且也可为制定水质标准、评价水环境质量和管理废水排放提供科学依据。

在鱼类急性毒性试验中,受试鱼的选择很重要,其选择原则一般为对污染物敏感、在生态类群中有一定代表性、来源丰富、饲养方便、遗传稳定和生物学背景资料丰富的种类。目前,国际通用的急性毒性试验的标准用鱼是斑马鱼,国内常用的试验鱼有鲍鱼、蠕鱼、草鱼、青鱼、金鱼、鲤鱼、食蚊鱼、非洲卿鱼、尼罗罗非鱼、马苏大马哈鱼、泥鳅和斑马鱼等。

试验用鱼在受试物水溶液中饲养一定的时间,以96h为一个试验周期,每隔24h记录试验用鱼的死亡率,确定鱼类半数致死浓度,用24hLC50、48hLC50、72hLC50或96hLC50来表示。具体试验方法可参照《环境监测技术规范》(生物监测)、国内标准GB/T13267-1991《水质物质对淡水鱼(斑马鱼)急性毒性测定方法》、GB/T21814-2008《工业废水的试验方法鱼类急性毒性试验》和国际标准ISO7346。

目前采用的急性毒性试验方法有静态试验、半静态试验(换水试验)和动态试验(流水试验)。试验方法的选择主要取决于受试材料的性质和实验室的设备条件。如果条件具备,不论对何种毒物或废水都要尽可能地采用流水试验。

二、搔类活动抑制试验

搔类是淡水生物的重要类群,是水体中初级生产者(藻类)和消费者(鱼类)之间的中间环节,以搔类、真菌、碎屑物及溶解性有机物为食,对水体自净起着重要作用。搔类繁殖快、生命周期短、培养简便、对许多毒物敏感、产仔多且试验项目使用的参数在个体涧相对恒定,可以为试验结果统计学处理提供方便,因此被选定为国际标准毒性测试生物。已广泛应用于评价化学污染物、工业废水等毒性的研究上。

搔类急性活动抑制试验是将幼搔(试验开始时搔龄小于24h)以一定的浓度范围暴露于受试物溶液中48h,相对于空白对照组,观察记录24h和48h受试物对搔类活动抑制情况。通过对结果分析,计算48h的EC50。

大型搔是搔科中个体最大的种类,体长可达6mm,生殖量多,是毒性试验使用最广的一种。具体试验方法可参照国内标准GB/T16125-2012《大型搔急性毒性实验方法》、GB/T21830-2008《化学品搔类急性活动抑制试验》和国际标准ISO6341。

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