食品中志贺氏菌检验

志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌）是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原微生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。

志贺氏菌的生物学性状

（1）形态与染色志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长2-3um，宽0.5-0.7um。不形成芽抱，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C为49一53克分子％(Tm法）。

(2）培养特性志贺氏菌需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。37℃培养18-24h后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏志贺氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。

(3)生化特性本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛基质产生不定，甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H₂S。根据生化反应可进行初步分类。

志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同，可分为两大组。

a．不分解甘露醇组：主要为志贺氏菌。又根据能否产生靛基质，进一步分靛基质阳性(1,3,4,5,6,9,10型）和靛基质阴性（2,7,8型）的痢疾志贺氏菌(S.dysenteriae）。

b．分解甘露醇组：包括福氏志贺氏菌（(S.flexneri),鲍氏志贺氏菌（S.boydii)、宋内氏志贺氏菌（S.sonnei)。再按乳糖分解情况，分为迟缓分解乳糖的宋内氏志贺氏菌和不分解乳糖的福氏志贺氏菌和鲍氏志贺氏菌。后者再根据靛基质产生与否进一步分靛基质阳性（福氏菌1,2,3,4,5型和鲍氏菌5,7,9,11,13,15型）和靛基质阴性（福氏菌6型和鲍氏菌1,2,3,4,6,8,10,12,14）两类（图4-8)a抗原构造与分型志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）组成。主要抗原有三种。

①型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是光滑型菌株所含有的重要抗原。当菌株变为粗糙型时，此抗原也常随之消失，各菌型所含的型抗原不同，可用于区别菌种的型别。

②群特异性抗原：为光滑型菌株的次要抗原，也是菌体抗原的一种。特异性较低，常在数种近似的菌内出现。在福氏菌株中，由于所含群抗原不同，可将某些菌型分为多种亚型，如福氏菌2型，根据群抗原不同，可分成2a,2b两个亚型。

③表面抗原（K抗原）：在新分离的某些菌株菌体表面含有此种抗原。不耐热，加热100℃1h即被破坏。具有此种抗原的菌株，可阻止菌体抗原与相应免疫血清发生凝集。

根据抗原构造的不同，将本属细菌分为四个群、39个血清型（包括亚型），见表4-9。

A群：也称痢疾志贺氏菌群，不发酵甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶，与其他各群细菌无血清学联系。

B群：也称福氏菌群，发酵甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶。抗原结构较复杂，各型间有交叉凝集。每一福氏菌型具有两种抗原，即型特异性抗原和群抗原，前者只存在于同型菌株中，后者有许多种，存在于福氏各菌型中。例如福氏lb型除含有1型特异性抗原外，尚含有4、6群抗原。

C群：也称鲍氏菌群，分解甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶。各型内无交叉凝集。

D群：也称宋内氏菌群，仅有一个血清型。分解甘露醇，有鸟氨酸脱羧酶，迟缓发酵乳糖。有I相（S相光滑菌落）、II相（R相粗糙菌落）之分。

(4）抵抗力志贺氏菌属在外界环境中的生存力，以宋内氏最强，福氏菌次之，志贺氏菌最弱。一般在潮湿土壤中能存活34d,37℃水中存活20d，在冰块中可存活96d，在粪便内（室温）存活lld。日光直接照射30min,56-60℃10min即被杀死，对高温和化学消毒剂很敏感，1％石炭酸中15-30min即被杀死，对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。

①变异性OS-R型变异：菌落可由光滑型变为粗糙型，同时常伴有生化反应、抗原构造和致病性的变异。在机体内，尤其在慢性患者和恢复期患者，志贺氏菌可发生变异而失去原来的生化和抗原特性，成为不典型菌株。但其中部分不典型菌株，可通过10％胆汁肉汤等返祖为典型菌株。故在慢性患者或带菌者粪便检查时，对这类菌株要特别注意，必须多次反复检查。因这对传染源的发现及控制有重要意义。

②耐药性变异：自从广泛使用抗生素以来，志贺氏菌的耐药菌株不断增加，给防治工作带来许多困难。国内部分地区报道（1972-1974)，志贺氏菌对四环素的耐药率达74％,氯霉素73.6％-97％、链霉素84％一98%、合霉素75％一100％,磺胺类97％一100％，可见国内志贺氏菌对常用几种抗生素的耐药率相当高。

③毒力变异与其他变异：1963年南斯拉夫Mel氏首先创用依赖链霉素的志贺氏菌株（依链Sd株）口服预防痢疾。Sd株是一株必须在链霉素存在下才能生长的菌株，其毒力减弱但仍保持免疫原性。美国以天然变异无毒株与大肠埃希氏菌杂交而获得的MH株制成疫苗，其免疫效果和稳定性均较Sd株差。我国正大力利用变异方法通过动物和药物处理等寻找安全有效、可供口服的痢疾杆菌活菌苗，并已取得初步成效。

志贺氏菌和大肠埃希氏菌都属于肠杆菌科，根据DNA杂交研究结果显示密切相关性，志贺氏菌属的四个种和大肠埃希氏菌属在生化上也是难以区分的，因为有产气的志贺氏菌，也有乳糖阴性、不产气、不运动的大肠埃希氏菌，有些大肠埃希氏菌也能引起痢疾状的腹泻。在志贺氏菌中，a．培养物常常是不运动的，赖氨酸是阴性。b．除了福氏志贺氏6型、鲍氏志贺氏13型和14型、痢疾志贺氏3型等少数菌株外，在糖发酵时不产气。c．发酵黏液酸或乙酸盐洋菜或Chiristensen柠檬酸洋菜。如呈碱反应的菌株则类似于大肠埃希氏菌。d.鲍氏志贺氏菌和痢疾志贺氏菌在美国很少见。