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定性定量和生物量的监测技术(浮游、底栖、着生)

发布时间:2017-03-09 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2998

一、浮游生物

1.定性定量监测

(1)水样的沉淀浓缩

将己固定的水样,放入1 000 ml沉淀器(沉淀器可用1 000 ml广口瓶或分液漏斗)中静置24 h,使其充分沉淀。然后缓慢吸出上层清液,将剩下的20 ml左右的沉淀物转入30 ml定量瓶中,再用吸出的清液冲洗沉淀器3次,每次的冲洗液仍转入定量瓶中,并使最终容量为30 ml。如果标本需长时间保存,应加入2~3 ml福尔马林

(2)定性调查

将新鲜或固定的水样,置于显微镜下进行属种鉴定。对于优势种应该鉴定到种,一般种类可鉴定到属。鉴定结束后,应将鉴定的种类列出名录。如果鉴定到种属有困难,可按蓝藻、裸藻、绿藻、金藻、黄藻、硅藻、甲藻、原生动物、轮虫、枝角类和桡足类等大类进行鉴定。

(3)定量调查

视野法计数:将定量瓶中的样品充分摇匀,采用合适体积的计数框进行总数计数或分类计数。每个样品计数2片,取其平均值;同一样品的两次计数之差超过±15%,需进行第3片计数,取两个近似的平均数作为计数结果(见表9.3)。

藻类、原生动物计数取0.1 ml,在l0x40~10x60倍显微镜下用0.1 ml的计数框进行藻类计数,计数50~300个视野,原生生物全片计数。

轮虫取1 ml,在10x10~10x20倍显微镜下用1 ml计数框进行全片计数。

甲壳动物取5 ml或8 ml,在10x10~10x20倍显微镜下用5 ml或8 ml计数框进行全片计数。

每升水中浮游植物的个体数,按下列公式计算:

式中:N—1L水中浮游生物的个体数;

Cs—计数框面积,mm2 ;

Fs—每个视野的面积,mm2 ;

Fn—计数过的视野数;

V—1L水样经沉淀浓缩后的体积,ml;

U—计数框的体积,ml;

Pn—每片计数出的浮游生物个体数。

单位体积浮游动物的数量,按下列公式计算:

式中:N—1L水样中浮游动物的数量,个/L;

V—采样的体积,L;

Vs—样品浓缩后的体积,ml;

Va—计数样品体积,ml;

n—计数所获得的个体数,个。

在沉淀浓缩过程中,应注意虹吸沉淀清液的速度,虹吸时管口要始终低于水面,流速、流量不能太大,沉淀和虹吸过程不可摇动,吸至澄清液的1/3时,应逐渐减缓流速,以免搅动了沉淀而前功尽弃,如搅动了底部应重新沉淀。

2.生物量的监测

(1)浮游植物生物量的测定

浮游植物生物量一般按体积来换算。这是因为浮游植物个体积小,直接称重较困难,且其细胞比重多接近于1。可用形态相近似的几何体积公式计算细胞体积。细胞体积的ml数相当于细胞重量的克数。这样体积值(um3)可直接换算为重量值(109um3≈1 mg鲜藻重)。

下列体积公式,可供计算生物量时参考:

圆锥体:V=1/3πR2 h

圆柱体:V=πR2 h

球体:V=4/3πR3

椭圆体:V=4/3ab2π(a为长轴半径,b为短轴半径)

长方体与正方体:abxh或a3

硅藻细胞的计算通式:V=壳面面积x带面平均高度

不规则性藻类可分为几个部分计算。

每种藻类至少随机测量20个以上,求出这种藻类个体重的平均值,一般都制成附表供查找。此平均值乘上1L水该种藻类的数量,即得到1L水中这种藻类的生物量(mg/L)。

由于同一种类的细胞大小可能有较大的差别,同一属内的差别就更大了,因此必须实测每次水样中主要种类(即优势种)的细胞大小并计算平均重量。

目前国内利用浮游植物丰度和生物量对水质进行评价的标准是:生物量在1~1.5 mg之间的为贫营养型;生物量在1.5~5 mg之间的为中营养型;生物量大于5 mg的为富营养型。

(2)浮游动物生物量的测定

由于浮游动物大小相差极为悬殊,因此不分大小、类别而只列出一个浮游动物总数有较大的片面性,不能客观地评价水体的供饵能力。为了正确地评价浮游动物在水生态结构、功能和生物生产力中的作用,生物量的测算显得尤为必要。目前,测定浮游动物生物量主要有体积法、排水容积法、沉淀体积法和直接称重法。

①体积法。本方法就是把生物体当做一个近似几何图形,按求积公式获得生物体积,并假定相对密度为1,这就得到体重。这种方法在原生动物、轮虫中广为应用。轮虫的体形有圆形、椭圆形、球形、矩形、锥形等。在活体情况下,在解剖镜下将所需的轮虫种类用毛细管吸出,放在载玻片上,加入适量的麻醉剂(如苏打水),使其呈麻醉状态;或将玻片上的水徐徐吸去,吸到轮虫仅能作微小范围运动为止,然后把载玻片放在显微镜下,用目测微尺测量其长、宽和厚度亦可通过显微镜微调进行近似测量。
②排水容积法。本方法根据水不可压缩的原理,用一根改短的滴定管,直径1.5 cm,长20 cm,样品容器为一管状物,由黄铜框架和孔径为112um的网衣组成。先把该容器放入上述改短了的已知液体体积的滴定管中以获得空容器的体积,然后把采得的浮游动物放入该容器,尽量用力摔出黏附在样品空隙中的液体,量其体积,如此重复5次,平均后则获得浮游动物的体积。

③沉淀体积法。本方法很简单,把用冈具捞取的浮游动物样品放在有刻度的滴定管中,经一定时间沉淀后读出沉淀体积。

④直接称重法。几何图形法和容积法获得只是近似值。有时误差较大,直接称重法就是把测重的生物体,用微量天平直接称其体重,可以测定湿重或者干重。

原生动物、轮虫体重的测定方法。先将滤膜浸湿,用真空泵抽去多余的水分,称取滤膜的湿重。将一定体积剔除杂质的样品倒入放有称重过滤膜的滤器中,用真空泵抽去多余的水分,称取其重量,两者相减为样品中原生动物或轮虫的湿重。将载有原生动物或轮虫的滤膜放在恒温干燥箱中(70℃左右),干燥24 h后,称其干重。

甲壳动物体重的测定方法。把新鲜的或用4%福尔马林固定的标本,通过不同孔径的铜筛作初步分级,筛选出不同的规格级。然后在解剖镜下,挑选体型接近的个体集中在一起,根据个体的大小确定称重个体的数目,一般为30~50个,体长小于0.8 mm的个体则称重150个以上。用真空泵先抽去多余的水分然后,称其湿重;后在恒温干燥箱中干燥24 h后,再放在干燥器中2h,称其干重。

卵的重量。枝角类的卵一般较大,可直接从孵育囊中取出,称其湿重和干重;挠足类的卵一般较小,但均为球形,用体积法就可获得较佳的结果。用目微尺量出卵的平均直径(D)后,代入球体公式(V=1/6πD3)便可求出体积V,在按相对密度为1.05求出卵的重量。

桡足类的卵重还可根据怀卵雌体与非怀卵雌体重量之差获得卵囊的重量,然后再除以卵囊的卵数,则获得实际卵重。

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