各种动物和人体的所有组织均可用于培养。但实际上，只有幼年时的组织，尤其是胚胎组织和增殖很快的肿瘤组织，以及其他分化程度低的组织比较容易培养。从体内取材时，应注意无菌操作，防止污染。对采自体表或与外界相通腔道的组织，应将所取的组织放入含两性霉素（2mg/ml)、青霉素（500～1000U/ml)、链霉素（500～1000ug/ml）的培养液中浸泡10～20分钟。取材之后应立即制备细胞进行培养，否则应把组织剪成lmm3左右的小块，放入培养液中，置4℃保存，但存放时间不宜超过24小时。

一、胚胎和成体组织来源

一般来源于胚胎组织的培养物比成体组织更易生存和生长，胚胎组织离体后容易培养成功。而成体组织的年龄越大，体外培养的成功率越低。这可能与胚胎存在可增殖的前体细胞或胚胎干细胞分化水平较低有关。而成体组织中大部分是非繁殖的分化细胞，当细胞分化时生长会受到严重限制或完全停止，故成体来源组织细胞培养，细胞的增殖极为困难，且培养物生命周期缩短。

原代细胞培养常用动物与人的胚胎组织制备，而广泛使用的胚胎细胞系则是各种鼠胚胎成纤维细胞3T3细胞系以及人二倍体WI-38, MRC-5等胚胎肺成纤维细胞系。来自中胚层的细胞（成纤维细胞、内皮细胞、成肌细胞）比上皮细胞、神经细胞或内分泌细胞容易培养，而且中胚层的细胞对血清中含有的有丝分裂因子敏感，易发生细胞的分裂繁殖。胚胎组织有很多实用的优点，但胚胎组织不同于成体细胞，尚不能推测它们成熟后变成成体细胞的类型，制备原代细胞早期培养时，多采用成纤维细胞的培养液，适于成纤维细胞、内皮细胞等的生长。新近开展的选择性培养液技术多为上皮细胞等细胞类型设计，其中有些血清成分能抑制细胞生长并能促进细胞分化。

二、正常和肿瘤组织来源

1．正常组织来自正常组织的细胞，获得了有限传代的培养物即为原代细胞（仅能传1～3代）和二倍体细胞（可传30～50代）。由于培养技术的进步，近年来也出现了几个来自正常组织但能连续传代的细胞系，如狗肾传代细胞系（DMCK）和3T3成纤维细胞等，来源于正常组织细胞虽可转化成连续的细胞系，但不具致肿瘤性。正常组织来源的细胞通常是由未分化的干细胞或前体细胞繁衍生成，当开始分化时常伴随细胞分裂的停止，这种停止可能是永久性的。有些来自正常组织的细胞也能分化，如成纤维细胞或内皮细胞具有分化能力，但仍能分裂，恢复生长繁殖后又可能再分化，而鳞状上皮细胞以及大多数造血干细胞，一开始就进入分化而无恢复繁殖的能力。

2．肿瘤组织取肿瘤组织做细胞培养时，固体中央往往发生坏死，故应选择瘤体的周围瘤组织做培养。然而来自肿瘤组织的培养物，能表现极少部分的分化能力，可于分化的同时保持分裂能力，如B16黑色素瘤细胞。但这种分化能力是否能作为正常的分化尚不得而知。实验室中应用的连续细胞系绝大多数来源于肿瘤组织，这些细胞的外观性状通常作为细胞形态学改变的标准（如细胞较小，缺乏贴壁，形态变圆，细胞核与胞质比例较高，失去单层细胞性质等）。细胞生长率增加，细胞周期缩短，血清依赖性减少，克隆效率增加，异倍体细胞及非整倍体细胞增加，并增加肿瘤的致癌性。

来自正常或肿瘤组织的细胞，在体外经过几次传代培养后死亡（有限传代细胞系）或转化（无限传代细胞系）。在整个传代过程中，培养物主干细胞是否先前就存在被有限细胞种群掩盖的无限细胞，还是在传代增殖中新出现的转化细胞，目前还不清楚，推测这种转化是一种变异的结果（染色体重排、移位、部分离散或整个离散，或点突变），但也不能排除先前就存在着不死亡的无限细胞，特别是肿瘤组织来源的细胞。体外培养细胞的转化主要是获得不死性（immortality)，这是在生长抑制中同时或后来产生的改变，是在正、负基因控制下发生的。充分的分析证明，不死性系细胞凋亡基因缺失或凋亡基因活化等的结果。肿瘤组织通常可在同系的宿主动物中传代，当得不到天然的同系宿主时，肿瘤组织也可在无胸腺的裸鼠中繁殖，这就提供了一个廉价的大量生产细胞的简单方法。但纯度较低。然后再做体外克隆培养进行纯化。