一、实验目的

    掌握粮食中有机氯农药多种残留分析的原理和方法。

    二、实验原理

    样品中的有机氯农药残留以有机溶剂提取，经液液分配及柱色谱净化除去干扰物质后，经气相毛细管色谱柱分离，以电子捕获检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。

    三、仪器与试材

    1．仪器与器材

    气相色谱仪(带电子捕获检测器)、组织捣碎机、振荡器、旋转蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、具塞锥形瓶、分液漏斗、色谱柱等。

    2．试剂

    除特别说明，实验中所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或去离子水。

    (1)常规试剂与溶液：石油醚(沸程60～90~C，重蒸)、苯(重蒸)、丙酮(重蒸)、乙酸乙酯(重蒸)、无水Na2SO4、石油醚一乙酸乙酯混合液95+5，体积比)。

    (2)弗罗里硅土：色谱分离用，于620℃灼烧4h后备用，用前于140℃烘2h，趁热加5％水灭活。

    (3)农药标准品：见表2—13，共10种。

    (4)标准溶液：分别称取表2—13中的标准品，用苯溶解并配成lmg／mL的储备液。使用时，根据各农药品种在仪器上的响应情况，吸取不同量的标准储备液，N~"att醚稀释成混合标准使用液。

    3．实验材料

    1～2种稻谷、小麦、玉米，各250g。    

    四、实验步骤

    1．样品提取

    (1)取样品100g粉碎，过40目筛。

    本实验中所用农药标准品：α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p,p’-滴滴涕、p,p’-滴滴滴、p,p’-滴滴伊、o,p’-滴滴涕、七氯、艾氏剂。

    (2)取10.00g样品粉末，置于100mL具塞锥形瓶中，加入20mL石油醚，振荡0．5h，过滤，得滤液。

    2．样品净化

    (1)净化柱的制备：垂直固定玻璃色谱柱，先加入1cm高的无水Na2SO4，再加入5g水灭活的弗罗里碓土，最后加入1cm高的无水Na2SO4，轻轻敲实，用20mL左右的石油醚淋洗净化柱。注意应确保色谱柱填料始终浸泡于石油醚巾。

    (2)准确吸取提取液2mL，加入净化柱，用l∞mL石油醚乙酸乙酯混合液洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，在旋转蒸发仪上于45℃浓缩至近于，用少量石油醚分数次溶解残渣于刻度离心管中，定容至1.0mL，以：5000r／min离心15min。

    3．测定

    (1)吸取1 μL混合标准使用液进样于色谱仪，记录色谱峰的保留时问和峰高。再吸取lμL样品净化液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时问和峰高。将各组分在色谱图上的出峰时问与标准组分比较进行定性，用外标法定量。

(2)参考色谱条件：色谱柱为石英弹性毛细管柱[0.25mm(内径)×15m，内涂有OV-101固定液]；气体流速，氮气为40mL/min，尾吹气为60mL／min，分流比为1：50；柱温自180℃升至230℃并保持30min；检测器、进样口温度均为250℃。

    4．计算

    样品中各有机氯农药残留的含量按下式计算：

    xi=himsiV2 / hsiV1m

    式中，xi为样品中i农药残留的含量，mg／kg；msi为标准品中i组分农药的质量，ng；V1为样品的进样体积，μL；V2为样品净化液的最后定容体积，mL；hsi为标准品中i组分农药的峰高；hi为试样中i组分农药的峰高；m为样品的质量，g。

    五、注意事项

    1．实验步骤中的色谱条件仅作参考，实验时应根据仪器种类与型号以及实验条件进行预备实验，以确定最佳色谱条件。

    2．石油醚非常容易挥发，因此实验操作应迅速，并确保实验室通风状态良好。

    3．在本实验条件下，各种有机氯农药的出峰顺序及检出限。

    六、思考题

    1．写出你在实验中使用的气相色谱仪的型号以及各部件的名称与功能。

    2．样品中农药残留的提取和净化是非常重要和必要的，如何考察样品中各种农药残留的提取效率?