1.吲哚 （靛基质）试验

(1)原理：某些细菌具有色氨酸酶，能分解培养基中的色氨酸产生吲哚，吲哚与试剂（对二甲氨基苯甲醛）作用，形成玫瑰吲哚而呈红色。

(2)方法：将待检细菌接种于蛋白胨水培养基中，35℃孵育1～2天，沿管壁慢慢加入吲哚试剂0.5 mL，即可观察结果。

(3)结果判断：两液面交界处呈红色反应者为阳性，无色为阴性。

（4）注意事项：蛋白陈中应含有丰富的色氨酸，否则不能应用。

2．尿素试验

(1)原理：某些细菌能产生N酶，分解尿素形成氨，使培养基变为碱性，酚红指示剂变为红色。

(2)方法：将待检细菌接种于尿素培养基中，35℃孵育1～4天。

(3）结果判断：呈红色者为尿素试验阳性。

(4）注意事项：尿素培养基颜色的变化是依靠出现碱性来实现的，故对尿素不是特异的。某些细菌如铜绿假单胞菌利用培养基中的蛋白胨可分解为大量氨基酸，使pH值升高而呈碱性，造成假阳性。因此，必须用无尿素的相同培养基作为对照。

3.氨基酸脱羧酶试验

(1)原理：有些细菌能产生某种氨基酸脱羧酶，使该种氨基酸脱去羧基，产生胺（如赖氨酸→尸胺、鸟氨酸→腐胺、精氨酸→精胺），从而使培养基变为碱性的，使指示剂变色。

(2)方法：挑取纯菌落接种于含有氨基酸及不含氨基酸的对照培养基中，加无菌石蜡油覆盖，35℃孵育4天，每日观察结果。

(3)结果判断：若仅发酵葡萄糖显黄色，为阴性；由黄色变为紫色，为阳性。对照管（不含氨基酸）为黄色。

(4)注意事项：①由于脱羧酶培养基含有蛋白胨，培养基表面的蛋白胨氧化和脱氨基作用可产生碱性反应，所以培养基应封闭，隔绝空气，以消除假阳性反应；②不含氨基酸的空白对照管，孵育18～24 h后，仍应保持黄色（发酵葡萄糖）。

4．苯丙氨酸脱氨酶试验

(1)原理：有些细菌产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱去氨基产生苯丙酮酸，与三氯化铁作用形成绿色化合物。
(2)方法：将待检细菌接种于苯丙氨酸凉脂斜面上，3 5℃孵育18～24 h，在生长的菌苔上滴加三氯化铁试剂，立即观察结果。

(3)结果判断：斜面呈绿色为阳性。

(4)注意事项：①注意接种菌量要多，否则会出现假阴性反应；②苯丙氨酸脱氨酶试验在加入三氯化铁试剂后，应立即观察结果，因为绿色会很快褪去，不管阳性或阴性结果，都必须在5 min内做出判断。

5．硫化氢试验

(1)原理：细菌分解培养基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、半胱氨酸等）产生硫化氢，硫化氢遇到铅或铁离子产生黑色硫化物。

(2)方法：将培养物接种于醋酸铅培养基或克氏铁琼脂培养基中，35℃孵育1～2天，观察结果。

(3)结果判断：呈黑色者为阳性。

6．精氨酸双水解（ADH）试验

(1)原理：精氨酸经两次水解后产生鸟氨酸、氨及二氧化碳，鸟氨酸又在脱羧酶的作用下生成腐胺，氨与腐胺均为碱性物质，可使培养基指示剂变色。

(2)方法：将待检菌接种于精氨酸双水解培养基上，35℃孵育1～4天，观察结果。

(3)结果判断：溴甲酚紫指示剂呈紫色为阳性，酚红指示剂呈红色为阳性，呈黄色为阴性。

(4)应用：主要用于肠杆菌科细菌及假单胞菌属某些细菌的鉴定。