大多数细菌对于常用治疗药物能够产生获得性耐药。因此，临床微生物检验科室除了对引起感染的病原微生物进行分离鉴定之外，检测病原微生物对于抗微生物药物的敏感性也是临床医生非常关注的另一项工作内容。测定细菌对抗菌药物敏感性（或耐药性）的步骤称为抗菌药物敏感试验（antimicrobial susceptibility testing, AST)。非苛养菌和兼性厌氧菌的AST是本章的重点。

AST的目的和指征：①预测抗菌药物的治疗效果；②临床治疗效果差而考虑更换药物时，应测试细菌对拟选药物的敏感性；③开展所在医院、地区的常见病原菌耐药性监测并定期将结果通报于临床；④评价新药的抗菌谱及抗菌活性等药效学指标；⑤掌握耐药菌的流行病学特征，以便控制耐药菌的流行与播散。AST最主要目的是为了检测细菌对于潜在治疗药物的耐药性。一般来说，大多数病原微生物的固有耐药性众所周知，因此，对于此类微生物进行鉴定即可，不需要进行耐药性的检测。AST实质上是针对临床上重要的、抗菌药物敏感性未知的细菌检测其获得性耐药程度的试验。为确保耐药性检测的准确性受环境因素的影响最小化，AST的试验条件必须标准化：优化细菌的生长条件以确保细菌的生长抑制是由于抗菌药物作用而不是受到营养、温度或其他环境因素的影响；优化抗菌药物的保存条件以确保抗菌药物的活性；在不同的微生物实验室检测也能保持对同一病原菌检测结果的可重复性和稳定性。

经过大量的临床实验室实践摸索，美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI）的抗菌药物敏感试验分会建立并发布AST的标准条件指南，并且随着临床实践的变化而不断更新。AST标准化的内容包括六个方面：①细菌的接种量；②培养基（最常见的是:Mueller-Hinton培养基）的pH值、离子浓度、血液和血清添加物、胸昔或胸腺嘧啶含量；③培养箱的气体环境；④培养温度；⑤培养时间；⑥受试抗菌药物的浓度。虽然进行AST时可将体外试验条件标准化，但是体外环境还是无法确切地模拟抗菌药物和细菌实际相互作用的体内环境。除此之外，AST也不能体现出实际影响人体用药效果的几个重要因素：抗生素在组织或宿主细胞中的分布、血清蛋白与抗菌药物的结合、药物间的相互作用和干扰、患者免疫防御系统的状态、患者同时患有多种疾病、致病菌的毒力和致病力、感染发生的二部位和严重性等。尽管受到以上限制，细菌对于抗菌药物的耐药性在很大程度上影响感染患者的预后和死亡率。早期获得耐药性数据有助于选择抗菌药物、制定最佳治疗方案。因此，根据体外AST的数据结合其他诊断信息、能帮助临床医生开展治疗，体外AST也为临床上重要细菌的耐药性趋势监测提供了数据。是否应进行AST取决于以下三个关键因素：①受试菌株具有临床意义；②需要预测抗菌药物治疗的效果以帮助选择药物；③对于受试菌的AST已经建立可信赖的标准方法。

基于细菌在体外常规剂量下对在血液或组织可达到的药物水平的反应，AST的结果分为敏感、中介、耐药和非敏感。敏感是指对感染部位使用推荐剂量时，该菌株通常被抑制。中介是指抗菌药物的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration, MIC）接近血液和组织中通常可达到的浓度，疗效低于敏感株。注意：中介表示药物在生理浓集的部位具有临床效力（如尿液中的喹诺酮类和β-内酰胺类）或者可使用高于正常剂量的药物进行治疗（如β-内酰胺类）。另外，中介还作为缓冲区，以防止微小的、未受控制的技术因素导致较大的错误结果，特别是对那些毒性范围狭窄的药物。耐药指菌株不能被常规剂量抗菌药物达到的浓度所抑制，和／或抑菌圈直径落在某些特定细菌可能的耐药机制范围内（如β-内酰胺酶），或在治疗研究中表现为抗菌药物对菌株的临床疗效不可靠。非敏感用在仅有敏感解释，无中介或耐药解释的细菌（即仅有敏感解释折点）。受试菌株MIC值高于或抑菌圈直径低于敏感解释折点时称为不敏感。注意：①“不敏感”并不意味着分离菌存在一种耐药机制。不敏感分离菌的MIC（或抑菌圈直径）可能位干以前公认的野生型敏感结果范围内。②对于结果为“非敏感”的菌株，应该确认细菌鉴定是否正确以及AST的试验结果。