螺杆菌属（Helicobacter)形态与弯曲菌属类似，是一类弯曲呈逗点状、S形、螺旋形或“海鸥展翅形”的革兰阴性菌，大小为(0.2～0.5)um×(0.5～5.0)um，在陈旧培养物的涂片中有时可呈球杆状。无芽胞，有动力。营养要求高，生长较缓慢，培养时需要微需氧环境，最适生长温度为37℃,25℃不生长，3.5％ NaCl条件不能生长。触酶、氧化酶阳性，大多数螺杆菌有很强的脲酶活性。本属细菌多定植于哺乳动物的胃或肠道，从人与动物的胃黏膜、男性同性恋者血液和粪便及田鼠的肠道中均可分离出该属细菌。模式菌种为幽门螺杆菌。

1982年Marshall和Warren首先用微需氧技术从慢性胃炎、消化性溃疡患者的胃黏膜中分离出弯曲状的细菌，并证明该细菌感染胃部会导致胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡，他们由此获得了2005年诺贝尔生理学和医学奖。

一、分类

螺杆菌属归于弯曲菌目螺杆菌科。幽门螺杆菌最初因形态、分离培养方法与弯曲菌属细菌相似，仅从胃标本中分离到，故称为幽门弯曲菌（Campylobacter pylon )。随着对该菌的研究日益增多，人们发现该菌在很多方面与弯曲菌不同，遂在1989年建立一个新属，即螺杆菌属，幽门弯曲菌也改称为幽门螺杆菌（Helicobacter pylori ,Hp)。

本属至少有23种细菌，大部分定居于哺乳动物的胃或肠道中，有9个种可从人体分离得到，其中能引起人类疾病的主要有3种，即幽门螺杆菌（H.pylon)、菲氏螺杆菌（H.fennelliae）和同性恋螺杆菌（H.cinaedi)。本章主要叙述模式菌幽门螺杆菌。

二、临床意义

Hp感染呈全球性分布，人群中有50％曾被感染。Hp与慢性浅表性胃炎或萎缩性胃炎之间的关系已充分确立：流行病学资料表明Hp感染率高的人群中胃癌发病率也较高。其主要传播途径是口-口途径和粪-口途径。该菌为一种高度适应生活于胃黏膜黏液内层的细菌，菌体周围微环境pH值为7.0，胃窦是其定植的最佳部位。

Hp确切致病机制尚不清楚。可能与下列因素有关：① Hp特殊的螺旋状和端鞭毛有助于Hp穿过胃黏膜表面的黏液层并与胃黏膜上皮细胞接触；②Hp具有高活性的胞外脲酶可分解尿素，产生氨以中和菌体周围胃酸，在菌体周围形成一个中性的微环境，有助于细菌定植；③空泡毒素（VacA）在体外能诱导多种哺乳动物细胞质发生空泡变性，在体内可导致小鼠胃黏膜上皮细胞损伤和溃疡形成；④Hp可将其产生的细胞毒素相关蛋白A (cytotoxin associated protein, CagA)注入胃黏膜上皮细胞中，影响胃黏膜上皮细胞基因表达，进而诱导上皮细胞产生多种细胞因子，吸引炎症细胞释放多种酶类而致胃组织损伤。研究表明CagA的存在与消化道溃疡以及胃癌的发生密切相关。

三、微生物学检验

（一）检验程序

螺杆菌属的检验程序见图20-2。

图20-2螺杆菌属的检验程序

（二）标本采集与处理

经胃镜用活检钳于近幽门部、胃窦部或病变邻近处多位点采取样品。立即送实验室处理或放入转运培养基如Stuart’s转运培养基内（防止干燥),4℃中保存不超过24 h，组织标本也可放入含20％甘油的半胱氨酸Brucella肉汤中-70℃冷冻保存。受检者术前停服铋剂或抗菌药物一周，尽量不作咽喉麻醉，活检组织标本应切碎并研磨均匀。

（三）标本直接检查

1．直接显微镜检查①不染色标本直接镜检：将活检组织切碎并研磨均匀，涂片或悬滴，置相差或暗视野显微镜下观察，HP 形态典型、呈“投镖样”运动。②直接涂片染色、镜检：将活检黏膜组织在玻片上涂抹后，经革兰染色或单染色后镜检，如发现典型形态的Hp即可诊断。革兰染色时，Hp不易被染．上颜色，为了更好地观察，建议用苯酚复红(carbolfuchsin）或沙黄（safranin)作为复染剂，后者作为复染剂时复染时间应延长至2～3 min,③组织切片染色镜检：组织块固定，切片经Warthin-Starry(W-S)银染色、吉姆萨染色后镜检Hp，以W-S银染效果最好。④免疫组化：该方法可检出胃黏膜组织切片中的完整Hp及破碎的菌体或抗原成分，特异性高。⑤间接免疫荧光法（IIF)：为快速、敏感、特异性的诊断方法。

2．快速脲酶试验将部分研碎的活检组织放入装有尿素培养基的瓶内，37℃孵育2 h,Hp产生高活性脲酶可将尿素分解，使培养基pH值升高，培养基颜色由黄色变为红色。Hp的脲酶活性也可以通过尿素呼吸试验进行检测，患者口服了¹³C或¹⁴C标记的尿素后，Hp的脲酶降解这些标记的尿素，产生的¹³CO₂或¹⁴ CO₂被吸收进血流后，在呼气时通过闪烁计数器可被检测到。这是一个既敏感又特异的用于检测Hp感染及治疗效果的试验方法。

3．核酸检测现有的方法是从克隆的Hp染色体DNA的特异性片段中构建引物或从Hp脲酶A基因序列中构建引物，用PCR扩增并结合限制性酶切多态性分析技术鉴别Hp，可检测出尚不能分离培养的Hp。

4.粪便标本抗原检测可采用酶联免疫方法直接测定粪便标本中的抗原。该方法适用于不能进行¹³C或¹⁴C标记尿素呼吸试验或胃镜检查的患者。

（四）分离培养与鉴定

1．分离培养培养基宜新鲜配制，非选择性培养基可用巧克力琼脂或含5％羊血的Brucella琼脂，选择性培养基可用Skirraw琼脂或改良的Thayer-Martin琼脂。将研磨均匀的标本用研磨棒蘸取适量匀浆接种，接种后的平板放入35～37℃、微需氧(5％ O₂、10％CO₂、85％ N₂)、湿润的环境中培养至少72 h方可见到Hp菌落。其菌落较小，为圆形、半透明菌落。

2.鉴定主要根据培养特点、菌落特征、典型的菌体形态、染色性、氧化酶和触酶均阳性、脲酶强阳性、对萘啶酸耐药、头孢噻吩敏感等进行鉴定。幽门螺杆菌的生物学特征见表20-2。

表20-2幽门螺杆菌的生物学特征

注：+表示阳性结果，-表示阴性结果；V表示可变的结果。

（五）抗体检测

采用ELISA、乳胶凝集试验、补体结合试验、间接免疫荧光法等免疫学方法检测患者血清中Hp抗体可帮助临床诊断或进行流行病学调查，其中以ELISA试验应用最为普遍。