1．实验目的

1)了解紫外-可见分光光度计的结构、性能及使用方法。

2)熟悉定性、定量测定的方法。

2．仪器与试剂

(1)仪器

紫外-可见分光光度计、容量瓶(1000mL、250mL)、比色管(50mL)、吸量管(5mL、10mL)。

(2)试剂

苯酚(AR)。

苯酚储备液：准确称取苯酚0. 010g于200mL蒸馏水中，溶解后定量转移到1000mL的容量瓶中，作为储备液。

苯酚标准溶液：于5支50mL的比色管中，用吸量管分别加入0.5 mL、2mL、5mL、10mL、20mL的10ug/mL苯酚储备液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。

3．实验原理

苯酚是，种剧毒物质，可以致癌，已经被列入有机污染物的黑名单。但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。

定性分析时，可在同一条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较两者光谱图样进行鉴定。在没有标准样品的情况下，可与标准谱图进行比较。

定量分析是在270nm处，通过测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光度值绘制标准曲线。再在此条件下测定未知样品的吸光度，从标准曲线中得出未知样品苯酚的含量。

4．实验数据处理

(1)最大吸收波长的选择

在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200～300nm之间以10nm为间隔测定其吸收波长，在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定，直至找到最大吸收波长。

(2)标准曲线绘制

在已筛选的最大波长下，以水为参比分别测定上述标准溶液的吸光度，画出c-A曲线，写出回归曲线方程。

(3)苯酚浓度的测定

在相同情况下，测定其吸光度。根据回归曲线方程计算出待测苯酚浓度。