二、色谱法术语

气相色谱法仅限于柱色谱，液相色谱既可在柱中也可在平板上进行。柱色谱的物理化学基本原理对平板色谱同样有效。因此，色谱法术语以及对色谱理论方面的讨论均着重于柱色谱。

柱色谱分离使用色谱柱(chromatographiccolumn)，它是由色谱固定相充填在惰性材质的圆柱管体内构成。以分配色谱为例，固定相是将固定液涂渍在有化学惰性的多孔材料载体(carrier)上或空心柱管内。当试样组分在气体或液体流动相中，并在柱管内移动时，同时在气液间或液液问进行不断地反复分配，因各组分的分配系数不同，各组分逐一在柱后流出，实现了组分分离。现代柱色谱法配有专门的检测器，对分离后各组分直接进行测量。

试样中各组分在色谱柱内获得分离后，按先后顺序流经检测器，检测器将流动相中各组分浓度的变化转换为可检测的电信号，由记录仪记录下信号一时间曲线，这一曲线称为色谱图(chomatogram)，也称色谱流出曲线。

l色谱图

色谱图记录了色谱分离过程，反映了试样组分在色谱柱或色谱体系内的运行特点；反映r试样中不同组分在柱内的差速迁移，及同一组分分子在柱内迁移过程中的分子分布离散形成的浓度分布。从而在色谱图上形成组分流出时间的差异，以及形成峰形的强度信号分布。色谱图也就成了色谱分析定性定量的依据，也是研究色谱过程机理的依据。

在淋洗法色谱过程中，检测器输出的信号有两种形式，即微分曲线与积分曲线。常见的色谱图是微分曲线形式，它可用专门的术语来描述。

2．基线(baseline)

没有组分从色谱柱中进入检测器时，检测器响应的流出曲线，称为基线。它是反映检测系统噪声随时间变化的情况，如图21—2中0t线。在实验条件稳定时，基线应为接近平行于横坐标的水平直线。

3．保留值(retention)

溶质的色谱行为可以用保留体积‰(或相对应的保留时间t)和分配比(或容量比k)描述，流速乘以时间转化为体积，假定流速是不变的，保留时间与保留体积可交换使用。

保留值反映了被分离的组分在性质上的差异，据此可进行定性判断。同时保留值也反映了组分分子与固定相之间的作用力，所以对色谱过程的机理研究有着重要的作用。

(1)用时间表示的保留值

①死时间(deadtime)t0是不被固定相保留的组分从进样到出现信号最大值需的时间，可以看作流动相流过色谱柱所需的时间。

②保留时间(retentiontime)tR是试样组分通过色谱柱所需的时间，也就是待测组分从进样开始后到柱后出现信号极大值时所需的时问。

③调整保留时间(adjustedretentiontime)tR是扣除了死时间的保留时间，表示试样组分通过色谱柱时，固定相所滞留的时间，即

t_R=t_R—t0(21一1)

(2)用体积表示的保留值

①死体积(deadvolume)VR是不被固定相保留的组分从进样到柱后出现信号极大值时所通过的流动相的体积。它与死时间的关系为：

Vo=toFv(21—2)

式中，，v为色谱柱出口处的流动相的体积流速(通常用校正后的体积流速)。

②保留体积(retentionvolume)VR是试样组分通过色谱柱所需的流动相的体积，即进样开始后到柱后出现待测组分信号极大值时所通过的流动相的体积。并有：

V_R=t_RF_v(21—3)

③调整保留体积(adjustedretentionvolume)％是从保留体积中扣除死体积后的体积。

V_R=V_R一V0(21—4)

式(21—4)表示了试样组分通过色谱柱时，由于固定相的作用所耗费的流动相体积。

4．色谱峰的区域宽度(peakwidth)

在色谱峰符合正态分布时，通常用以下一些术语来定义。

(1)半峰宽(peakwidthathalf—height)Wh/2又称半宽度，即为峰高一半h／2处的峰宽。

式中，σ为色谱流出曲线为正态分布峰的标准差(standarddeviation)。

(2)峰底宽(peakwidthatpeakbase)又称基底宽度，为峰两侧拐点处所作切线在基线上载取的距离，并有：

W=4σ(21—6)

同样，色谱峰的区域宽度也可用记录纸色谱图上的距离(mm或cm)、时间(min或s)或体积(ml)表示。体积由时间和流动相的体积流速求出。

例1在某一色谱柱上，分离苯(b)、甲苯(t)，测得其相应色谱峰的保留时间分别为2．5min和5．5min，死时间为1．0min，并在柱后测得流动相的体积流速经校正后为40m1／min。求：(1)计算苯、甲苯的保留体积与调整保留体积?(2)甲苯停留在固定相中的时间为苯的几倍?

解：(1)苯的保留体积V_R=t_RF0=2．5min×40ml／min。100(m1)

甲苯的保留体积V_R=t_RF0=5．5×40=217(m1)

苯的调整保留体积V_R=(t_R一tM)F0=(2．5—1．0)×40=60(m1)

甲苯的调整保留体积V_R=(tR一tM)Fo=(5．5—1．0)x40=180(m1)

(2)停留在固定相中的时问即为调整保留时间，甲苯是苯的3倍。