液相色谱的发展史实际上也是固定相颗粒技术的发展史。颗粒度的改变直接影响到柱效，从而对分离结果产生直接影响。因此，同定相颗粒度是评价高效液相色谱的又一个重要的因素。如前所述，降低固定相的颗粒度可提高液相色谱的柱效，这时表示使用较短的柱长电可达到较长柱子一样的分离度。

随着颗粒度的不断降低，色谱分离度不断提高。这一规律的理论基础就是著名的van Deemter方程，van Deemter曲线表明，随着颗粒度减小，理论塔板高度(HETP)也下降，柱效会更高，使用1．7μm颗粒的HETP最小值区域扩大，也表明可在比大颗粒更宽的流量范围内得到最高的柱效，可在不损失高分离度的同时优化流速、提高分析速度。然而，颗粒技术的运用有许多技术难点，不但要求仪器在超出目前限度(6000psi／400 bar)的压力下工作，同时要求仪器系统体积要更小，以便不影响梯度性能，而且还要求检测器能高速检测出峰宽只有几秒的色谱峰。以WatersUPLCTM为代表的超高效液相色谱系统的出现，充分利用了小颗粒填料的所有优点，弥补传统HPLC系统的不足，把全局设计思路用于所有集成的部件，包括从进样到数据采集。

随着小颗粒填料的使用，液相色谱达到了惊人的分离能力，而进入了超高效液相色谱的新时代。基于小颗粒技术的超高效液相色谱技术，与传统的HPLC技术相比，大幅度高的分离效率，因而具有更强的分离能力。结束了多年来在速度和分离度之间难以取舍的历史。使用超高效液相色谱可以在很宽的线速度、流速和高压下进行高效的分离。满足药物分析时基质复杂、目标化合物浓度很低的特点。

使用小颗粒技术可得到更窄的色谱峰宽，从而改善了分离度，提高了的柱效；同时，当超高效液相色谱用于快速分析、使用较短色谱柱而使柱效不变时，色谱峰高会相应增加。正是因为色谱峰更窄、更高，从而提高了灵敏度。由于超高效液相色谱系统使用更细小的颗粒，柱长可比通常缩短2—3倍而保持柱效不变，且可在高2～3倍的流速下进行，使分离过程时间缩短数倍。超高效液相色谱的快速分析还节省了以往耗时的方法认证的时间，使方法认证变得简单快速。