众所周知，若要讲各类分析仪器的性能技术指标，就必须要讲测试方法。因为对同一个指标，用不同方法测试出的数据是不同的。所以，不讲测试方法只讲技术指标是不对的。本节主要根据仪器学理论和作者的实践，从物理概念出发，讨论HPLC的性能技术指标及其测试方法。

1.使用者对HPLC整机技术指标的基本要求

一般HPLC使用者对HPLC的指标要求归纳起来大致有以下几个主要方面。

(1)灵敏度高(检测限小)。特别是微量或超微量分析工作的要求更是如此。

(2)噪声小。它是限制仪器灵敏度的主要性能技术指标，它是限制检测下限的指标。

(3)漂移小。它是HPLC稳定性的主要内容之一(稳定性包括漂移和重复性)，它是影响检测器可靠性的主要性能技术指标，也是可靠性的主要内容之一。

(4)量程范围大。能保证在较宽的浓度范围内测量时，还能得到准确、可靠的测试数据。

(5)线性范围宽。最好能在样品有几个数量级的变化时，也能测得可靠的数据。

(6)对使用环境要求不高。能够适应在不同的环境下工作。

(7)死体积小。便于使用者清洗流动池、减少流动池的污染。

(8)对样品没有破坏性。

(9)性价比高。检测器的性能优异，但是价格合理。

2. HPLC整机的主要性能技术指标及其测试方法

HPLC的检测器有30多种，常用的有UVD、FLD、UV/FLD、RID(示差折光检测器)，ELSD(蒸发光散射检测器)，MSD(质谱检测器)和用来作为HPLC检测器的各种光谱仪器等。这些检测器已在各个领域得到了广泛的应用，特别在药品、环保、生命科学、粮食科学、农业科学、食品科学等领域应用更加广泛。国际上生产光学类HPLC检测器的厂商很多，但是无一不带紫外检测器(UVD)。中国目前有近20家生产HPLC的企业，基本上都生产UVD检测器。有的HPLC只有UVD一种检测器，而无其他检测器。目前，国内外许多制造商在HPLC的光学类检测器的主要技术指标测试方面还存在许多问题，最主要的问题是对HPLC光学类检测器的主要技术指标的物理概念尚未搞清楚、这些指标对分析结果的误差有多大影响未搞清楚、这些指标的测试方法没有搞清楚。所以，目前国内外对HPLC光学类检测器的主要技术指标测试方法很不统一。作者在从事HPLC的紫外分光检测器和荧光检测器仪器研究和应用研究的过程中，对其主要技术指标及其测试方法进行了较深入的研究。本书将根据仪器学理论结合作者的实践，从设计、使用、维修的不同角度，对HPLC的光学类检测器的8项主要技术指标，提出简易可行的测试方法。因为是从仪器学理论角度提出的方法，所以这些方法具有通用性：从事固定波长的紫外检测器仪器研究和应用研究者亦可参考。

2.1 HPLC的灵敏度、测量限和检测限的测试方法

(1)灵敏度的测试方法。HPLC的灵敏度可定义为一定量的物质，通过HPLC的检测器时，仪器所给出的信号大小。灵敏度有时也称为响应值。对使用者来讲，总是希望HPLC仪器有较高的灵敏度。因为灵敏度高，就意味着对等量的同一样品进行检测时，仪器有较大的响应信号。但是，灵敏度的高低，并不能表示HPLC仪器的检测能力。只有检测限，才能表示仪器的最大检测能力。

HPLC灵敏度的测试方法：主要根据信噪比的定义进行测试，一般取信号等于或大于噪声的2倍作为HPLC的灵敏度。分别测试噪声和信号值的大小，二者相除即为仪器的灵敏度(但是要求S/N≥2)。

(2)测量限的测试方法。测量限是指在某一条件下，仪器能测出的量值。它取决于仪器传感器的响应，与仪器的噪声无关。用仪器学理论解释，就是仪器传感器的响应(灵敏度)越高，测量限就越好(小)。如果仪器的噪声大到与信号相等或大于信号时，测量限将受到噪声的限制。

HPLC测量限的测试方法：一般采用实际样品测试能测量出峰高，并且其峰高能分辨出来，即该值就是测量限。

(3)检测限的测试方法。检测限又叫最小检出限或检测极限，它是指仪器的最大检测能力的大小，既与仪器传感器的响应有关，又与仪器的噪声有关。它也可以表征HPLC的灵敏度。

检测限或最小检出限的测试方法：先测出噪声(Abs)，再测出信号(Abs)，典型的最小检出限数值是其噪声的2倍或3倍。一般制造者和使用者都是用实际样品测试HPLC的检测限，如用萘或蒽来测试。其具体操作方法是：仪器处在最灵敏量程，配置不同浓度的萘或蒽，测试出S/N≥2时的最小值即是检测限。最小检测限与检测器的性能相关，所以最可靠的测试方法不应该是用实际样品，而是测试S(信号)/N(噪声)。

某些外国公司为了说明HPLC仪器的优秀，他们在新品发布会上宣传仪器的实际测试谱图时，使用最差(最大)灵敏度量程、非常浓的样品(但是不给样品的具体浓度)；结果色谱图非常好看，但是实际这种HPLC并不好用。我们说讲HPLC的指标、给出HPLC的色谱图，应该实事求是的给出使用时的灵敏度量程(一般使用最灵敏量程)，给出样品浓度(一般是噪声的3倍左右)，才能说明仪器的检测限或灵敏度。