HPLC定量分析也是依据组分的量与检测器响应值(峰高或峰面积)成正比的关系。定量测定时，可根据样品的具体情况采用峰高法或峰面积法，但多采用峰面积法。

药典规定如下几种定量测定法。

1．内标法加校正园子测定供试品中某个杂质或主成分含量

2．外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量

3．面积归一化法

4．加校正因子的主成分自身对照法

加校正因子的主成分自身对照法通常用于杂质含量测定。建立方法时，按药典中各品种项下的规定，精密称(量)取杂质对照品和待测成分对照品各适量，配制测定杂质校正因子的溶液，进样，记录色谱图，按上述1法计算杂质的校正因子。

此校正因子可直接载入各品种项下，用于校正杂质的实测峰面积。这些需作校正计算的杂质，通常以主成分为参照采用相对保留时间定位，其数值一并载入各品种项下。

测定杂质含量时，按各品种项下规定的杂质限度，将供试品溶液稀释成与杂质限度相当的溶液作为对照溶液，进样，调节检测灵敏度(以噪音水平可接受为限)或进样量(以柱子不过载为限)，使对照溶液的主成分色谱峰的峰高约达满量程的10％～25％或其峰面积能准确积分[通常含量低于0．5％的杂质，峰面积的相对标准偏差(RSD)应小于10％；含量在0.5％～2％的杂质，峰面积的RSD应小于5％；含量大于2％的杂质，峰面积的RSD应小于2％]。然后，取供试品溶液和对照品溶液适量，分别进样，供试品溶液的记录时间，除另有规定外，应为主成分色谱峰保留时间的2倍，测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较，依法计算各杂质含量。

5．不加校正因子的主成分自身对照法

当没有杂质对照品时，也可采用不加校正因子的主成分自身对照法。同上述4法配制对照溶液并调节检测灵敏度后，取供试品溶液和对照溶液适量，分别进样，前者的记录时间，除另有规定外，应为主成分色谱峰保留时间的2倍，测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积并与对照溶液主成分的峰面积比较，计算杂质含量。

若供试品所含的部分杂质未与溶剂峰完全分离，则按规定先记录供试品溶液的色谱图I,再记录等体积纯溶剂的色谱图II。色谱图I上杂质峰的总面积(包括溶剂峰)，减去色谱图Ⅱ上的溶剂峰面积，即为总杂质峰的校正面积。然后依法计算。

系统适用性试验

与气相色谱一样，HPLc法也要求进行系统适用性试验。药品检验时，可参照药典的有关规定，用规定的对照品对色谱系统进行试验，应符合要求。如达不到要求，除另有规定，该品种项下的条件，除填充剂品种、流动相组分、检测器种类不得随意改变外，其余如色谱柱内径、长度、品牌、产商来源，填充剂品牌、粒径，流动相流速、混合流动相的各组分比例，温度，进样量，检测器灵敏度等，均可适当调整，以适应具体条件和达到系统适用性试验的要求。