聚酰胺薄层也是吸附薄层的一种，由于聚酰胺分子内存在很多酰胺基，可与酚类、酸类、醌类及硝基化合物等形成氢键，因而对这些物质产生了吸附作用。聚酰胺与各类化合物形成氢键的能力一方面决定于化合物本身的结构，如分子中游离羟基的数目、位置、共轭双键数目等，同时也与展开剂的极性有关，一般来讲，在水中形成氢键的能力最强，在有机溶剂中形成氢键的能力较弱，在碱性溶剂中形成氢键的能力最弱，因此在聚酰胺薄层上展开剂洗脱能力的顺序为：

水<乙醇<甲醇<丙酮<稀氢氧化铵(钠)溶液<甲酰胺<二甲基甲酰胺

为了在聚酰胺薄层上分离混合物，常采用以上溶剂不同比例组合的多元展开剂。

分配薄层色谱法和纸色谱法的展开剂选择原则是根据化合物在展开剂中的溶解度，或根据化合物在固定相和流动相中的分配系数K，K值越小，或被分离物质在展开剂中溶解度越大时，则在分配薄层上得到的月，值就越大。一般在选择展开剂时，可将对所分离的各化合物溶解度相差最大的溶剂组成不同比例的展开剂，优先进行试验。

在分配色谱中展开剂应先用固定相饱和，否则在展开过程中，展开剂将固定相带走一部分或全部，进而产生不良的分离结果。饱和的方法是把展开剂在操作温度下与少量固定相在分液漏斗中充分振摇，放置分层后，分去固定相层，留下的作为展开剂用。例如用水为固定相的纤维索薄层，用正丁醇或酚为展开剂时，必须将此展开剂与水在分液漏斗中剧烈振摇，放置分层后分出用水相饱和的正丁醇或酚层供用；又如用甲酰胺作纤维素薄层的固定相时，用苯-三氯甲烷(1:1)为展开剂，则展开剂必须先用甲酰胺饱和。

分配色谱按所用固定相不同可分成3种类型，每一类型所用的展开剂也不同。

1．水做固定相

用纤维素作支持剂和用水做固定相时，其分离原理与纸色谱相同，因此文献报道纸色谱用的展开剂多数也适用于纤维素薄层。常用的展开剂有水饱和的酚、水饱和的正丁醇、一定比例的正丁醇一乙酸一水、异丙醇一氢氧化铵一水等。

分配薄层中的支持剂只起支持固定相的作用，因此活性小的硅藻土也可用作分配薄层的支持剂，只要使硅藻土吸附一定量的固定相，再用合适的展开剂就可使被测物质得到分离。

2．亲水有机相做固定相

在进行分配薄层分离中等极性或非极性化合物用水做固定相时，由于化合物在水中溶解度较小，分离效果不好，可改用亲水有机相做固定相进行分配薄层，纸色谱同样可以用亲水有机相处理后进行分配纸色谱。常用的亲水有机相有甲酰胺、乙二醇、丙二醇、聚乙二醇等。

在以亲水有机相为固定相的分配色谱中，常用的展开剂有正己烷、苯、三氯甲烷或它们的一定比例组合等，可用于甲酰胺或乙二醇作固定相，而异丙醚一甲酸一水混合展开剂则用聚乙二醇做固定相。

3．反相分配色谱

以滤纸、纤维素、硅藻土、硅胶为支持剂，用石蜡油、硅酮油、正十一烷等亲脂性有机物做固定相，或将滤纸乙酰化处理，常用一定比例的甲醇一水或丙酮一水、乙酸一水或乙腈一水、乙酸一乙腈一水、三氯甲烷一甲醇一水等极性大的展开剂来分离某些亲脂性化合物，因为和以水为固定相、有机溶剂为展开剂相反，故称反相分配。而且组分的Rf值与水做固定相时所得到的也相反，即极性越大，脂溶性越小的组分其Rf值越大；而极性越小、脂溶性越大的化合物R值越小。这种反相分配法在展开过程中固定相常会被展开剂带走一部分而得不到很好的分离重现性，因此现在反相薄层色谱多采用化学键合相薄层板。