本法是以醋酸纤维素薄膜为支持介质的区带电泳。醋酸纤维素是指纤维素羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯，由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时问短，样品用量少，使蛋白质可得到满意的分离效果。现已为中国药典等药品标准中人血白蛋白及人血丙种球蛋白纯度检查的法定方法，取代了早期使用的纸电泳法。

醋酸纤维素薄膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化，有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。

(1)仪器装置

电泳室及直流电源同纸电泳。

(2)试剂

①醋酸纤维素薄膜一般使用市售商品。
      ②常用的电泳缓冲液为pH 8．6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05～O.09moL/L。制法：取巴比妥2．76g、巴比妥钠15.45g，加水溶解使成1000ml。
      ③氨基黑染色液 取O.5g的氨基黑10B，溶于甲醇50ml、冰醋酸lOml及水40ml的混合液中。
      ④漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5ml及水50ml，混匀。
      ⑤透明液 取冰醋酸25ml，加无水乙醇75ml，混匀。

(3)操作法

①取醋酸纤维素薄膜，裁成2—8cm的膜条，将无光泽面向下，浸入巴比妥缓冲液(pH 8.6)中，待完全浸透，取出夹于滤纸中，轻轻吸去多余的缓冲液后，将膜条无光泽面向上，置电泳槽架上，经滤纸桥浸入巴比妥缓冲液(pH 8.6)中。

②点样与电泳 于膜条上距负极端2cm处，条状滴加蛋白含量约5％的供试品溶液2—3μ1，在lO～12V／cm电位梯度下电泳。电泳区带距离以4～5 cm为宜。

③染色 电泳完毕，将膜条取下浸于氨基黑染色液中，2—3分钟后，用漂洗液浸洗数次；直至脱去底色为止。

④透明 将洗净并完全干后的膜条浸于透明液中10～15分钟，取出平铺于清净的玻板上，干后即成透明薄膜，可于分光光度计上测定和作标本长期保存。

⑤含量测定 未经透明处理的醋酸纤维素薄膜电泳图可按各品种项下规定的方法测定，一般采用洗脱法或扫描法，测定各蛋白质组分的相对含量(％)。

a．洗脱法 将洗净的膜条用滤纸吸干，剪下供试品溶液各电泳图谱的电泳区带，分别浸于1.6％的氢氧化钠溶液中，振摇数次，至洗脱完全，于一定波长下测定吸光度。同时剪取与供试品膜条相应的无蛋白部位，同法操作作对照。先计算吸收值总和，再计算各蛋白组分所占比率(％)。

b．扫描法将干燥的醋酸纤维素薄膜用色谱扫描仪通过反射(未透明薄膜)或透射(已透明薄膜)方式在记录器上自动绘出各蛋白组分曲线图，横坐标为膜条的长度，纵坐标为吸光度，计算各蛋白质组分的含量(％)。亦可用微机处理积分计算。