T-2毒素主要是三线镰刀菌产生的单端孢霉烯族化合物(trichothecenes, TS)之一，化学名称为4,15-二乙酰氧基-8-(异戊酰氧基)-12, 13-环氧单端孢霉-9-烯-3-醇。到目前为止，从真菌培养物及植物中已分离出化学结构基本相同的单端抱霉烯族化合物148种。T-2毒素为无色针状结晶，熔点为150～151℃，相对分子质量466.51，该化合物非常稳定，在正常条件下，可长期贮存而不变质。T-2毒素难溶于水，易溶于极性溶剂，如三氯甲烷、丙酮和乙酸乙酯等。在烹调过程中不易被破坏。T-2毒素基本结构为四环的倍半萜，G₉和C₁₀位上有一不饱和双键，在紫外线下不显荧光。

大多数单端孢霉烯族化合物是由镰刀菌属的菌种产生的，镰刀菌属的菌种广泛分布于自然界，这些真菌及其毒素主要侵害玉米、小麦、大米、燕麦、大麦等谷物，是食品或饲料中最严重污染物，也是毒性最强的真菌毒素之一。人畜误食该毒素污染的谷物后，可引起恶心、呕吐、头痛、腹泻、腹痛等急性中毒症状，导致骨髓组织的坏死和内脏器官出血，引起心肌受损，皮肤组织坏死，破坏造血组织和免疫抑制。能扰乱中枢神经系统，阻碍DNA和RNA的合成，导致遗传毒性及致死。T-2毒素的主要毒性作用为细胞毒性，免疫抑制和致畸作用，甚至还有很高的致癌性。我国于1996年就制订了小麦、玉米及其制品中T-2毒素的限量标准为≤1000ug/kg。

T-2毒素的检测方法主要有薄层色谱法、气相色谱法、酶联免疫吸附法、免疫亲和柱-荧光计法。本实验主要介绍免疫亲和柱-荧光计测定法。

(一)检测原理

试样中的T-2毒素用甲醇提取后，提取液经过滤，稀释后，加入T-2毒素衍生液，以甲醇将亲和柱上的T-2毒素淋洗后收集于小试管中，用荧光计进行测定，T-2毒素在紫外灯下不显荧光。

(二)试剂和仪器

1．试剂

甲醇(色谱级)；PBS缓冲液；氯化钠；VICAMT-2毒素衍生液；VICAMT-2毒素标定用溶液；0.02％吐温/PBS缓冲液：0.1 mL吐温-20+9.9mL PBS缓冲液＋490mL水。

2．仪器

4-系列真菌毒素专用荧光计；均质器(250mL)；微量移液器(0.5 mL)；涡流混合器；塑料注射器(60mL) ; VICAMT-2毒素亲和柱；聚乙二醇(PEG)，相对分子质量8000。

(三)检测步骤

1．样品提取

称取50g样品、5g氯化钠、10g PEG置于均质杯中，加入150mL 25％的甲醇，高速均质 1 min。用折叠式滤纸过滤，收集25 mL滤液于干净的烧杯中，用25 mL水将滤液稀释一倍。将T-2毒素亲和柱与塑料注射器相连，取40mL T-2毒素标定用溶液加入到塑料注射器中。

2.样品制备

在塑料注射器中加入0.5 mL的T-2毒素衍生液，用硅胶塞塞好，重复振摇4～5次，然后再置于操作架上。

3．色谱柱分离与测定

将空气泵与亲和柱相连，使注射器中的溶液以1～2滴/s的速度通过亲和柱。用0.02%吐温/PBS缓冲液以1～2滴/s的速度通过亲和柱；用2mL色谱级的甲醇以1滴/s的速度通过亲和柱，滤液收集于测试管中，将测试管置于荧光计中进行测定。

(四)注意事项

(1)色谱柱分离时，提取液通过亲和柱的流速要严格控制，否则结果影响荧光计测定。

(2)此方法的检测限为0.15mg/kg,测定范围为0～5.0mg/kg。

文章来源：《食品质量与安全检测技术》

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