磺胺喹噁啉属磺胺类抗生素兼有抗球虫作用，磺胺喹噁啉纯品为黄色粉末，几乎无味，不溶于水，溶于甲醇、乙醇，易溶于碱性溶液。广泛用于养禽业，其口服后吸收迅速，但排泄缓慢，残留在组织器官及鸡蛋中时间长。近年来我国鸡蛋产量大幅增加，如果蛋鸡场在使用磺胺类抗生素时没有遵守休药期规定，就会造成鸡蛋中药物残留超标，而长期食用有磺胺类抗生素残留的食品对人类健康有害。现介绍农业部1025号公告-15～2008高效液相色谱法检测鸡蛋中磺胺喹噁啉残留。

(一)实验原理

供试鸡蛋中残留的磺胺喹噁啉经乙酸乙酯提取，过无水硫酸钠柱净化，可用高效液相色谱-紫外法测定，外标法定量。

(二)试剂与仪器

1．试剂

①所用试剂，除乙腈为色谱纯外，其余均为分析纯试剂。磺胺喹噁啉含磺胺喹噁啉(C₁₄H₁₂N₄O₂S)不得少于98.0%。

②磺胺喹噁啉标准储备液：取磺胺喹噁啉对照品约25 mg，精密称定，置250mL量瓶中，用乙腈溶解并稀释成浓度为100ug/mL的储备液。-20℃以下保存，有效期为3个月。

③磺胺喹噁啉标准工作液：精密吸取磺胺喹噁啉标准储备液1.0mL于10 mL量瓶中，用流动相稀释成浓度为10ug/ mL的标准工作液。

2.仪器与设备

①高效液相色谱仪(配紫外检测器)，玻璃层析柱：300mm×10mm，下装G₁砂芯板，微孔滤膜：孔径为0.45um有机系滤膜。

②无水硫酸钠柱的制备：称取无水硫酸钠5g，置入玻璃层析柱中，用约 10mL乙酸乙酯淋洗后备用。

(三)操作步骤

1. 试料的制备

取适量新鲜的供试鸡蛋内容物，匀浆使均匀，作为供试试料。

取一份适量新鲜的空白鸡蛋内容物作为空白试料。另一份添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。

2．抗生素残留提取

称取试料(5±0.05)g置50mL离心管中，加入20mL乙酸乙酯，匀浆20s，振摇5min, 4000r/min离心10min，取上清液过无水硫酸钠柱，收集流出液于鸡心瓶中，残渣再加乙酸乙酯20mL，重复提取一遍，并用少量乙酸乙酯洗残渣，过无水硫酸钠柱，合并流出液于同一鸡心瓶中，于45℃旋转蒸发至近干。残余物用0.015mol/L磷酸溶液-乙腈溶液(1+1)1.0mL溶解，加入1mL水饱和正己烷，涡旋30s，将溶液转移至2.5 mL离心管中，5000r/min离心10min，取下层清液，用0.45 um微孔滤膜过滤，供高效液相色谱分析。

3．标准曲线的制备

精密吸取2.0、1.0、0.5、0.2、0.1、0.05、0.025mL磺胺喹噁啉标准工作液分别于10mL量瓶中，用流动相稀释成2、 1、0.5、0.2、0.1、0.05、0.025ug/mL的浓度，供高效液相色谱分析。

4．测定

(1)色谱条件C₁₈柱，150mm×4.6mm(i.d.)，粒径5 um，或相当者。流动相：0.015mo1/L磷酸溶液-乙腈(70+30)柱温：室温。流速：1.0mumin。检测波长：270nm。进样量：20uL。

(2)测定方法取适量试样溶液和相应的标准工作液，做单点或多点校正，以色谱峰面积积分值定量。标准工作液及试样液中磺胺喹噁啉的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下，磺胺喹噁啉的保留时间在5 min左右。空白试验：除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。

(3)结果计算按下式计算试料中磺胺喹噁啉的残留量：

式中X—试样中磺胺喹噁啉的残留量，ug/kg;

A—试样溶液中磺胺喹噁啉的峰面积；

P_s—对照溶液中磺胺喹噁啉的浓度．ng/mL ;

A_s—对照溶液中磺胺喹噁啉的峰面积：

V—溶解残余物的体积，mL ;

m—试样的质量，g。

计算结果需扣除空白值，测定结果用三次平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后两位。

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文章来源：《食品质量与安全检测技术》

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