荧光光谱仪是由光源、单色器、样品池、检测器等组成。其原理图如图13-5所示。由光源发出的光经激发单色器分光后得到特定波长激发光，然后入射到样品使荧光物质激发产生荧光，通常在90^o方向上进行荧光测量。因此，发射单色器与激发单色器互成直角。经发射单色器分光后使荧光到达检测器而被检测。另外，通常在激发单色器与样品池之间及样品池与发射单色器间还装有滤光片架以备不同荧光测量时选择使用各种滤光片。滤光片用于消除或减小瑞利散射光及拉曼光等的影响。在更高级的荧光仪器中，激发和发射滤光片架同时也可安装偏振片以备荧光偏振测量时选用。仪器是由计算机控制的，并可进行固体物质的荧光测量及低温条件下的荧光测量等。

图13-5 荧光光谱仪

13.1.4.1光源

激发光源具有强度大、适应波长范围宽这两个特点。

在大多数情况下，需要有一个比在吸收光谱测量中所用的钨灯或氢灯更强的光源。激发光波长固定的荧光计可用非连续光源，如汞弧灯在254 nm、365 nm、398 nm、436 nm、546 nm、579 nm、690 nm、734 nm产生强烈的线光谱，配合适当的滤光片可选取其中某一谱线作为激发光。通用性较好的荧光分光光度计大多采用氙灯，这种灯在紫外-可见光区都可提供很强的光。氙灯属于气体放电光源，与一般气体放电光源一样，稳定性较差，所以对电压的稳定性要求较高。

13.1.4.2单色器

荧光分光光度计中有激发和发射两个独立的单色器。大多数荧光光度计一般采用两个光栅单色器，有较高的分辨率，能扫描图谱，既可获得激发光谱，又可获得荧光光谱。激发单色器作用：分离出所需要的激发光，选择最佳激发波长λ_ex，用此激发光激发液池内的荧光物质。发射单色器作用：滤掉一些杂散光和杂质所发射的干扰光，用来选择测定用的荧光发射波长λ_em，在选定的λ_em下测定荧光强度，进行定量分析。

13.1.4.3样品池

荧光测量用的样品池通常用四面透光的方形石英池，用来盛放待测溶液。

13.1.4.4检测器

检测器用来将光信号转换成电信号，并放大转成荧光强度。荧光强度一般较弱，要求检测器有较高的灵敏度，荧光光度计多采用光电倍增管。现代荧光光谱仪中普遍使光电倍增管作为检测器。新一代荧光光谱仪中使用了电荷偶合元件检测器，可一次获得荧光二维光谱。

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文章来源：《分析化学分析方法的原理及应用研究》

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