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蒽酮比色法测定食品中的总糖及意义

发布时间:2014-08-07 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:8853

(一)食品中总糖的意义

食品中含有多种糖类,食品中的总糖通常是指具有还原性的糖(葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等)和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量。作为食品生产中的常规分析项目,总糖反映的是食品中可溶性单糖和低聚糖的总量,总糖的含量对产品的感官质量、组织形态、营养价值、成本等有一定影响,因此许多食品如麦乳精、糕点、果蔬罐头、饮料等的质量指标中都有总糖这一项。

食品中总糖测定方法包括直接滴定法、蒽酮比色法等。

(二)蒽酮比色法

单糖类遇浓硫酸时,脱水生成糠醛衍生物,它与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物,当糖的量在20~200mg范围内时,其呈色强度与溶液中糖的含量成正比,故可比色定量。该法是微量法,适合于含微量碳水化合物的样品,具有灵敏度高、试剂用量少等特点。

1.标准曲线的制作

称取1.0000g葡萄糖,用水定容到1000mL,从中吸取lmL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL分别移入100mL容量瓶中,用水定容,即得lOmg/mL、20mg/mL、40mg/mL、60mg/mL、80mg/mL、100mg/ml,葡萄糖系列标准溶液。吸取系列标准溶液和蒸馏水各2mL,分别放入7支具塞比色管中,沿管壁各加入蒽酮试剂10mL,立即摇匀。放入沸水浴中准确加热10min,取出并迅速冷却至室温,在暗处放置10min,用1cm比色杯,以零管调零点,在620nm波长下测定吸光度,绘制标准曲线。

2.样液测定

吸取样品溶液(含糖20~80mg/mL)和蒸馏水各2mL,分别放入2支具塞比色管中,其余方法同上,测定吸光值,根据样品溶液的吸光值查标准曲线,得出含糖量。

3.结果计算

X=c*稀倍数*10-4

式中 x——样品总糖(以葡萄糖计)的质量分数,%;

c——从标准曲线查得的糖浓度,mg/mL;

10-4——将mg/mL换算为%的系数。

4.试剂

①10~100mg/mL葡萄糖系列标准溶液。

②0.1%蒽酮溶液:O.1g蒽酮和1.0g硫脲,溶于100mL 72%硫酸中,储存于棕色瓶中,于0~4℃下存放。

5.注意事项

①该法有几种不同的操作步骤,主要差别在于蒽酮试剂中硫酸的含量(66%~95%)、取样液量(1~5ml)、蒽酮试剂用量(5~20mL)、沸水浴中反应时间(6~15min)和显色时间(10~30min),这几个操作条件之间是有联系的,不能随意改变其中任何一个,以免影响分析结果。

②反应液中硫酸的含量高达60%以上,在此酸度条件下,于沸水浴中加热,样品中的双糖、淀粉等会发生水解,再与蒽酮发生显色反应。因此测定结果是样品溶液中单糖、双糖和淀粉的总量。

③蒽酮试剂不稳定,易被氧化变为褐色。一般蒽酮试剂应现用现配,加入硫脲是作为稳定剂,在冷暗处可保存48h。

④本法要求控制条件严格,防止误差出现,同时要求样品溶液必须清澈透明,加热后不应有蛋白质沉淀,如样品溶液色泽较深,可用活性炭脱色。

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