1 范围

本标准规定了牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧及其代谢物脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸和喹乙醇代谢物3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧及其代谢物脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸和喹乙醇代谢物3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留量的测定。

本标准的方法检出限：卡巴氧、脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸和3-甲基喹噁啉-2-羧酸均为0.5 ug/kg。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分：总则与定义(GB/T 6379.1-2004，ISO 5725-1：1994，IDT)

GB/T 6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GB T 6379.2-2004,ISO 5725-2:1994,IDT)

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-1992,neq ISO 3696:1987)

3 原理

用乙腈＋乙酸乙酯(1+1)溶液提取肌肉和肝脏组织中的卡巴氧，提取液经正己烷脱脂后，旋转蒸发至干，残渣用甲酸(0.1％)＋甲醇(19+1)溶液溶解。样液供液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。

用甲酸溶液消化试样，使组织中天然存在的酶失活，然后加入蛋白酶水解，盐酸酸化，离心过滤后，过Oasis MAX固相萃取柱或相当者净化。先用二氯甲烷洗脱脱氧卡巴氧，再用2％甲酸乙酸乙酯溶液洗脱喹噁啉-2-羧酸和3-甲基喹噁啉-2-羧酸，氮气吹干洗脱液，残渣用甲酸＋甲醇(19+1)溶液溶解，样液供液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。

4 试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

4.1 甲醇：色谱纯。

4.2 乙腈：色谱纯。

4.3 甲酸：色谱纯。

4.4 正己烷。

4.5 乙酸。

4.6 浓盐酸。

4.7 乙酸钠。

4.8 二甲基甲酰胺。

4.9 乙酸乙酯。

4.10 中性氧化铝：200目～300目。

4.11 乙腈＋乙酸乙酯溶液(1+1)。

4.12 甲酸乙酸乙酯溶液：2％。向400 mL乙酸乙酯中加入10 mL甲酸，用乙酸乙酯定容至500 mL。

4.13 甲酸溶液：0.6 %。量取6.0 mL甲酸，用水溶解、定容至1 L。

4.14 甲酸溶液：0.1％。量取1.0 mL甲酸，用水溶解、定容至1 L。

4.15 甲酸＋甲醇溶液(19+1)。用190 mL甲酸溶液(4.14)与10 mL甲醇(4.1)混合。

4.16 盐酸溶液：0.1 mol/L。量取8.3 mL浓盐酸，用水溶解、定容至1 L。

4.17 盐酸溶液：0.3 mol/L。量取25 mL浓盐酸，用水溶解、定容至1 L。

4.18 Protease蛋白酶：Sigma P5147或相当者，-18℃以下保存。

4.19 蛋白酶水溶液：0.01 g/mL。称取1.00 g Protease蛋白酶(4.18)，用水溶解、定容至100 mL, 4℃保存。

4.20 乙酸溶液：10％。量取100 mL 甲酸，用水溶解、定容至1 L。

4.21 乙酸钠溶液：0.05 mol/L, PH =7。称取6.8 g乙酸钠用800 mL水溶解，再滴加10％乙酸溶液以调节溶液pH=7，用水定容至1L。

4.22 乙酸钠+甲醇溶液(19+1)。用190 mL乙酸钠溶液(4.21)与10 mL甲醇(4.1)混合。

4.23 甲醇+水溶液(1+4)。

4.24 Tris碱：Sigma T10503或相当者。

4.25 Tris溶液：1.0 mol/L。称取121 g Tris碱，用水溶解、定容至1L,4℃保存。

4.26 卡巴氧、脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸、3-甲基喹噁啉-2-羧酸、喹噁啉-2-羧酸-d4标准物质：纯度≥99％。

4.27 标准储备溶液：100 mg/L。准确称取适量标准物质，卡巴氧用二甲基甲酰胺溶解定容，其余标准物质分别用甲醇溶解定容，配成100 mg/L的标准储备液，在-18℃保存，可使用1年。

4.28 基质混合标准工作溶液：根据灵敏度和使用需要，用空白样品提取液配成不同浓度(ug/L)的基质混合标准工作溶液，在4℃保存，可使用1周。

4.29 内标工作溶液：准确称取适量内标标准物质，用甲醇溶解定容，配成100 ug/L的标准工作溶液，在4℃保存，可使用1周。

4.30 阴离子交换柱：Oasis MAX 60 mg, 3 mL，或相当者。用前分别用3 mL甲醇和3 mL水活化，保持柱体湿润。

4.31 滤膜：0.2um。

文章来源：《化学试剂标准汇编》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。