试样加温除去二氧化碳和乙醇，调pH值至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量测定。

1．试样处理

(1)汽水称取5.00～10.0g试样，放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水(1+1)调pH值约等于7，加水定容至10-20mL，经滤膜(HA0.45µm)过滤。

(2)果汁类 称取5.00-10.0g试样，用氨水(1+1)调pH值约等于7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经0.45µm滤膜过滤。

(3)配制酒类称取lO.0g试样，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水(1+1)调pH值约等于7，加水定容至适当体积，经0.45µm滤膜过滤。

2．高效液相色谱参考条件

柱：YWG-C18，4.6mm×250mm，10µm不锈钢柱。

流动相：甲醇：乙酸铵溶液(0.02mol／L)一5:95

流速：lmL／min。

进样量：10／µL。

检测器：紫外检测器，230nm波长，灵敏度0.2AUFS。

根据保留时间定性，外标峰面积法定量。

3．结果计算

X=A*1000/m*V2/V1*1000

式中X——试样中苯甲酸或山梨酸的含量，g／kg；

A——进样体积中苯甲酸或山梨酸的质量，mg；

V₂——进样体积，mL；

V₁-——试样稀释液总体积，mL；

m——试样质量，g。

4．试剂

(1)甲醇 经滤膜(0.5µm)过滤。

(2)稀氨水(1+1) 氨水加水等体积混合。

(3)乙酸铵溶液(O.02mol／l。) 称取l.54g乙酸铵，加水至1000mL溶解，经0．45µm滤膜过滤。

(4)碳酸氢钠溶液(20g／L) 称取2g碳酸氢钠(优级纯)，加水至100ml，振摇溶解。

(5)苯甲酸标准储备溶液 准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液(20g／L)5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸含量为1mg／mL，作
为储备溶液。

(6)山梨酸标准储备溶液 准确称取0.1000g山梨酸，加碳酸氢钠溶液(20g／l。)5mL，加热溶解，移入100ml。容量瓶中，加水定容至100mL，山梨酸含量为1mg／mL，作为储备溶液。

(7)苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液 取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.Oml，放入100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含苯甲酸、山梨酸各O.1mg／mL。经O.45“µm滤膜过滤。

5．仪器

高效液相色谱仪(带紫外检测器)。