7 分析步骤

7.1 蒸馏

称取20g试样，精确到0.01g，置于500 mL平底烧瓶中，加入90 mL水，使试样完全溶解。然后依次加入25g氯化钠(4.5)，2mL磷酸溶液(4.8)和几个素瓷片。开始加热蒸馏，收集前30 mL馏分。

7.2 净化

准确移取15 mL馏分(7.1)于60 mL分液漏斗中，加入5 mL碳酸氢钠溶液(4.11),混匀后加入6g氯化钠，使之溶解。然后用2×5 mL苯(4.2)提取两次，收集苯相。用3 mL碳酸氢钠溶液(4.10)洗涤苯相，弃去水相。再分别用2×4 mL氢氧化钠溶液(4.9)提取苯酚两次，收集氢氧化钠溶液，用磷酸(4.4)调节酸度至pH=3，加入2.5g氯化钠。

将上述溶液以约2.0 mL/min的流速通过经预处理的C₁₈固相萃取柱(4.16)，待溶液全部流出后，用0.5 mL水洗涤小柱，抽干5 min，然后用0.5 mL甲醇洗脱，收集洗脱液并用水定容至1 mL,摇匀后，供液相色谱仪测定。

7.3 测定

7.3.1 液相色谱条件

a)色谱柱：Hypersil 5 um C₁₈,150 mm×4.6 mm(内径)或相当者；

b)流动相：乙腈＋水(18+82);

c)流速：1.0mL/min;

d)检测波长：195 nm;

e)进样量：80 uL。

7.3.2 液相色谱测定

根据试样测定液中苯酚含量情况，选定峰高相近的苯酚标准工作溶液。标准工作溶液和试样测定液中苯酚的响应值均应在仪器测定的线性范围内。对标准工作溶液和试样测定液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，苯酚的参考保留时间为10.96 min。

7.4 平行试验

按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。

7.5 空白试验

除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。

8 结果计算

蜂蜜中苯酚残留量按式(1)计算：

式中：

X—试样中苯酚的残留含量，单位为毫克每千克(mg/kg) ;

h—试样测定液中苯酚的峰高，单位为毫米(mm) ;

h_s—标准工作溶液中苯酚的峰高，单位为毫米(mm);

C_s—标准工作溶液中苯酚的浓度，单位为微克每毫升(pg/mL) ;

V—试样测定液最终定容体积，单位为毫升(mL)；

m—最终试样测定液所代表的试样量，单位为克(g)。

注：计算结果需将空白值扣除。

9 精密度

GB/T 18932的本部分精密度数据是按照GB/T 6379-1986的规定，通过15个实验室对四个添加水平的试样所做的试验中确定的。获得重复性和再现性的值是以95％的可信度来计算。

9.1 重复性

在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r)，本部分的重复性限按方程式(2)计算：
蜂蜜中苯酚的含量在0.025mg/kg～0.20mg/kg范围：

lgr＝0.980 1 lgm-0.7532······(2)

式中：

m—两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。

如果两次测定值的差值超过重复性限，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。

9.2 再现性

在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)，本部分再现性限按方程式(3)计算：
蜂蜜中苯酚的含量在0.025mg/kg～0.20mg/kg范围：

1gR＝0.992 1 lgm-0.614 3······(3)

式中：

m—两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。

文章来源：《常用兽药残留量检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。