1 范围

GB/T 18932的本部分规定了蜂蜜中青霉素残留量的杯碟测定方法。

本部分适用于各种蜂蜜中青霉素残留量的测定。

本部分青霉素的方法检出限为0.025mg/kg。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过GB/T 18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。

GB/T 6379-1986测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(neq ISO 5725:1981)
GB/T 6682-1992分析实验室用水规格和试验方法(neq ISO 3696:1987)

3 原理

试样中残留的青霉素经用磷酸盐缓冲液溶解、离心后，取上清液作杯碟法测定，并用标准曲线进行定量。青霉素酶作确证试验。

4试剂和材料

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682-1992中规定的三级水。

4.1 试验菌种

藤黄微球菌(Micrococcus Luteus)。菌种号(China Microbial Culture Collection) CMCC(B)28001。

4.2 标准物质

青霉素钠。1663 IU/mg或相当者。

4.3 青霉素酶(β-内酰胺酶)

4.4 工作溶液的配制

4.4.1 磷酸盐缓冲溶液：pH6.0。称取8.0g无水磷酸二氢钾，2.0g无水磷酸氢二钾，溶解于水中并定容至1000 mL。

4.4.2 生理盐水：8.5g/L。称取8.5g氯化钠，溶解于1000mL水中，121℃高压灭菌20 min。

4.5 标准溶液的配制

4.5.1 青霉素标准储备溶液：准确称取(精确至0.1mg)青霉素标准物质(4.2)，用磷酸盐缓冲溶液(4.4.1)溶解并定容为1000ug/mL(按效价换算)的标准储备溶液。当天配制，当天使用。

4.5.2 青霉素标准工作溶液：取标准储备溶液(4.5.1)用磷酸盐缓冲溶液稀释，配制浓度为0.20、0.10、0.05、0.025和0.0125ug/mL的标准工作溶液。当天配制，当天使用。

4.6 菌悬液的制备

将试验菌种(4.1)接种于培养基2内，经(35±1)℃培养18 h～24 h。取适量培养液转种于培养基1斜面上，经(35±1)℃培养18 h～24 h。用10 mL生理盐水(4.4.2)洗下菌苔即为菌悬液。4℃保存，贮存期限2周。

文章来源：《常用兽药残留量检测方法》

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