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克伦特罗药物残留的速测技术—速测卡法

发布时间:2019-04-22 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:801

克伦特罗(clenbuterol),俗称瘦肉精,是一种斤肾上腺受体激动剂,在临床上用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。因该药可以提高瘦肉率,减少脂肪沉积和促进动物生长,被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂使用。作为饲料添加剂,克伦特罗的用量远超过临床用药剂量的5~10倍,人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所生产的禽畜产品后,残留的克伦特罗可引起食物中毒,通常会出现肌肉震颤、心悸、精神紧张、头疼、肌肉疼痛、晕眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状,严重者可引起死亡,对消费者健康构成极大危害。世界多个国家都有食用克伦特罗残留的食物导致食物中毒的案例发生,因此许多国家禁止在饲料中添加克伦特罗来增加动物的瘦肉率。

目前,瘦肉精的检测方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。

我国农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标准,确定了两种:即高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱-质谱法(GC-MS),其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法,其最低检测限为0.05ug/kg,优点是检测精确度高,且假阳性率低;缺点是检测过程繁琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC-MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC-MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低,已将GC-MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC-MS法的缺点同HPLC相似。

1.速测原理

检测卡的中央膜面上固定有两条隐形线,克伦特罗抗原固定在测试区作为检测线(T线),二抗固定在质控区作为对照线(C线)。当样品溶液滴入加样孔后,因层析作用往上扩散。如果样品溶液含有克伦特罗,将和T线上的胶体金抗体先行反应,T线将较C线显色淡或甚至无显色,判定为阳性。反之,卡上的T线显色与C线相近或偏深,判定为阴性。

2.速测范围

本方法适用于猪肉肝脏、肺脏、肾脏、瘦肉样品中盐酸克伦特罗的快速检测。

检出限:5ug/kg。

3.材料

快速检测卡;展开液;一次性吸管;5mL采样管;1.5mL样品液与展开液混合管。

4.速测步骤

(1)测试前将未开封的检测卡恢复至室温。

(2)取4g以上的瘦肉或内脏样本剪碎,装入5mL采样管中(以装满管子3/4为宜),拧紧管盖。放入90℃以上水浴中加热10min(肉熟透为准),取出冷却至室温。

(3)从铝箔袋中取出检测卡平放于台面(在1h内使用),同时取出用吸管封装的展开液,剪去吸管封口,取3滴(约100uL)到1.5mL离心管中,弃去吸管中剩余的展开液,用此吸管吸取加热后渗出的样品液,取3滴(约100uL)同样滴入到1.5mL离心管中,弃去吸管中剩余的样品液,用吸管混匀两种溶液后,垂直缓慢滴加3滴溶液到检测卡加样孔中并开始计时。结果在5~10min读取,如判读不明显可以延长时间10min。

5.结果判定

(1)如图4-6所示,阴性。T线比C线颜色深或一样,表示阴性(未检出)结果。

图4-6 克伦特罗药物残留速测结果判定图

(2)阳性。T线比C线颜色浅或T线无显色,表示阳性(瘦肉精含量>5ug/kg)结果。

(3)无效。未出现C线,表示操作过程不正确或试剂已失效。

6.说明

(1)脂肪会导致假阳性结果,取样时请弃去肉眼可见的脂肪部分。

(2)检测时避免阳光直射。

(3)本法不宜采用纯净水作为空白阴性对照。可用瘦肉精溶液作阳性对照。

(4)对于重复检测仍为阳性结果的样品,应送实验室进一步确定。气质联用法是瘦肉精检测的确证方法。

7.试剂质量控制

使用5ug/kg的盐酸克伦特罗标准溶液进行验证,应出现阳性反应结果。

相关链接:沙丁胺醇残留的速测技术—速测盒法

文章来源:《食品安全快速检测技术》

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