在用色谱、光谱、质谱等分析仪器对环境样品中某类或某种化合物进行分析测定之前，通常需要对样品进行萃取和净化，以达到分离富集被分析物、降低干扰的目的。常用的萃取技术有液液萃取黏(LLE),固相萃取(SPE)、超临界流体萃取黏(SFE)等。液液萃取技术发展最早，是最经典的萃取技术，现在仍然是AOAC；美国EPA、FDA；欧盟及我国制订的环境污染物分析标准方法中常用的萃取技术。但是，液液萃取技术需要消耗大量的有机溶剂，对环境造成一定的破坏，而且费时费力，难以提高分析速度，所以，近年来有逐渐被固相萃取、超临界流体萃取等新型萃取方法取代的趋势。在AOAC、EPA制订的新标准中，固相萃取、固相微萃取、超临界流体萃取等新技术所占的比重有了显著的增加。无论传统的液液萃取技术还是较新的固相萃取、固相微萃取、超临界流体萃取技术，萃取的原理是根据日标化合物和样品基质及干扰化合物的极性的差异来进行分离萃取的。这就不可避免地会遇到两个问题：一是极性相近的干扰物和日标化合物可能同时被萃取；二是如果目标化合物的极性很强，则提取难度增加。为解决这一问题，需要进一步开发特异性强的固相吸附剂或萃取技术。

免疫萃取技术是随着免疫技术在分析化学中的应用而发展起来的。目前研究最多的是免疫亲和固相萃取技术，其原理是将抗体固定在固相载体材料上，制成免疫亲和吸附剂，将样品溶液通过吸附剂，样品中的日标化合物因与抗体发生免疫亲和作用而被保留在固相吸附剂。然后用酸性黏(pH2～3)缓冲液或有机溶剂作为洗脱剂洗脱固定相，使目标化合物从抗体上解离，从而使目标化合物被萃取和净化。由于免疫亲和作用具有很高的特异性，所以免疫亲和柱可以很方便地从复杂样品基质中分离其他萃取方法难以萃取的目标化合物。

由于分子量小于1000的化合物一般不具有免疫原性，因此早期的免疫亲和萃取技术主要应用于生化分析中分离蛋白、激素、多肤等生物大分子。直到20世纪80年代以后，随着小分子免疫技术的突破，才具备了用于萃取环境中小分子污染物的可能。90年代中期以后，应用免疫萃取技术进行环境污染物分析的报道逐年增加。目前这种技术已被用于环境样品中农药及其代谢产物、多环芳烃(PAHs)、BTEX化合物(苯、甲苯、乙基苯、二甲苯的总称)、生物毒素等的萃取。其中，一些生物毒素的免疫萃取装置已实现了商品化(表8-1)。

表8-1 市售生物毒素免疫萃取装置

免疫亲和固相萃取技术的成功与否一般由如下因素决定。

(1)抗体根据不同要求，制备的多克隆或单克隆抗体应具有较高效价，并对某个日标化合物具有特异性，或者对某类化合物的特征基团具有特异性。

(2)抗体的固定化通过共价结合、包埋、生物分子捕获等方法将抗体固定在固相载体上，制成的免疫亲和吸附剂应尽可能保持抗体的生物活性。

(3)免疫吸附剂的性质 包括固定化抗体在载体上的结合密度、免疫吸附剂的容量(保留目标化合物的能力)及免疫吸附剂的贮存寿命和使用寿命。

(4)免疫萃取的条件其中选择合适的洗脱条件是获得较高回收率和重现性的重要条件，其他如溶液流速、非特异性结合等也是重要的影响因素。

通常，液体样品只需进行简单的过滤和调节pH值后就可以用免疫萃取柱进行萃取和分离。与传统液液萃取方法和固相萃取方法相比，免疫萃取不需对样品进行进一步净化，从而简化了样品前处理步骤。和传统的固相萃取方法一样，免疫萃取柱可以方便地实现和气相色谱、液相色谱的在线或离线联用，这有利于实现自动化，提高检测速度。由免疫反应所提供的特异性使免疫亲和固相萃取技术在萃取一些强极性化合物方面具有特殊的优势。另外，对于样品中的痕量目标化合物，传统固相萃取方法常常因为千扰化合物远远超过目标化合物而无法分析，而利用免疫亲和萃取方法则可以方便地实现痕量目标化合物的萃取与富集。近年来的研究进展也证明了免疫萃取技术是一项很有发展潜力的萃取技术。本文将对免疫萃取技术的开发所涉及的主要技术环节及应用情况进行介绍。

文章来源：《环境样品前处理技术》

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