1 范围

本标准规定了进出口甜叶菊中总糖甙含量的分光光度测定方法。

本标准适用于进出口甜叶菊中总糖甙含量的测定。

2 测定方法

2.1 方法提要

甜叶菊叶经沸水煮泡。用硫酸铝沉淀和正丁醇提取，以除去样品中色素、还原糖及其他杂质，得到的总糖甙水溶液与蒽酮-硫酸溶液共同加热，生成绿色的络合物，比色法测定样品中的总糖甙，标准曲线法定量。

2.2 试剂

除另有规定，所用试剂均为分析纯，水为蒸落水。

2.2.1 硫酸铝：化学纯。

2.2.2 水饱和正丁醇：将正丁醇用水饱和后备用。

2.2.3 蒽酮显色剂：精确称取0.20g蒽酮，溶于100mL 75％硫酸溶液中(需用时现配)。

2.2.4 甜叶菊甙标准储备溶液：精确称取甜叶菊甙0.500g，用水溶解并移入100 mL容量瓶中定容，此溶液相当于每毫升含5 mg甜叶菊甙。

2.2.5 甜叶菊甙标准工作溶液：取标准储备液10 mL,定容到100 mL，正溶液每毫升相当于0.5mg甜叶菊甙。

2.3 仪器

2.3.1 分光光度计。

2.3.2 旋转蒸发器。

2.4 测定步骤

2.4.1 样品处理

准确称取1.000g 样品于150 mL杯中，加入60 mL 预先煮沸的蒸馏水，用玻璃棒搅拌浸号在沸水浴中加热1h。取出，过滤至250 mL容量瓶中，滤纸上的残渣用60 mL热水洗入原烧杯件在水浴中加热1h，过滤于250 mL 容量瓶中，重复操作4次。滤液合并于同一250 mL容量瓶中，并用水定容到刻度。

吸取上述滤液25 mL于100 mL烧杯中，加入0.2g硫酸铝。待溶解后，用碱调节至pH 7，静置1h。将此溶液过滤于125 mL分液漏斗中。用水洗涤残渣，最后使体积成50 mL。用水饱和正丁醇50，25，25mL分三次提取，提取液收集于125 mL鸡心瓶中，在旋转蒸发器上浓缩至干，用蒸馏水溶解浓缩物并移入100 mL容量瓶中，定容。

2.4.2 测定

吸取10 mL蒽酮显色剂于25 mL比色管中，将比色管移入冰浴中冷却，10 min后，准确加入1.00mL样液，并用玻璃棒不断搅拌，使溶液混合均匀。

取6支25 mL试管，分别加入10 mL蒽酮显色剂，放入冰浴中，分别吸取甜叶菊甙标准工作溶液0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mL于试管内，分别依序加水1.00，0.90，0.80，0.70，0.60，0.50 mL，用玻璃棒搅拌均匀，将样品溶液、试剂空白液及甜叶菊甙标准溶液的试管放入沸水浴中加热10 min，并不断搅拌。取出，于冰浴中冷却至室温。用1 cm比色皿，以蒽酮试剂作空白，于610 nm处测吸光度，绘制标准曲线，样品得吸光值与曲线比较求出含量。

3 结果计算与表述

按式（1)计算试样中的总糖甙含量：

式中：X—试样中总糖甙含量，％；

c—测定样液中总糖甙的质量，ug。

m—样品质量，g。

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文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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