1 范围

本标准规定了进出口乳及乳制品中乳糖含量的分光光度测定方法。

本标准适用于进出口奶粉中乳糖含量的测定。

2 测定方法

2.1 方法提要

试样中加入硫酸锌溶液和氢氧化钡溶液以沉淀蛋白质等杂质，经离心后，上层样液中的乳糖在苯酚、氢氧化钠、苦味酸和亚硫酸氢钠作用下生成桔红色的络合物，用分光光度法测定，用标准曲线法定量。

2.2 试剂和材料

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

2.2.1 沉淀剂

2.2.1.1 4.5％氢氧化钡溶液。

2.2.1.2 5％硫酸锌溶液。

2.2.2 发色剂

2.2.2.11％苯酚溶液。

2.2.2.2 5％氢氧化钠溶液。

2.2.2.3 1％苦味酸溶液。

2.2.2.4 1％硫酸氢钠溶液。

2.2.2.5 使用时，按顺序以体积(1+2+2+1)配制，此发色剂置于冰箱中可使用一周。

2.2.3 乳糖标准品：纯度≥99％。

2.2.4 乳糖标准工作液：准确称取于70℃真空烘箱中烘至恒重的适量的乳糖标准品，加水溶解，移入500 mL容量瓶中，稀释至刻度，配成浓度为1 mg/mL的标准工作液。

2.3 仪器和设备

2.3.1 分光光度计。

2.3.2 离心机。

2.4 测定步骤

2.4.1 试样处理

称取约1g试样(精确至0.001g)，用水溶解移入100 mL容量瓶中，稀释至刻度。并准确移取2.5 mL于离心管中，加入2 mL硫酸锌溶液，0.5mL氢氧化钡溶液，用小玻璃棒轻轻搅匀后，以约2000 r/min的转速离心2 min，上层澄清液作为样液，供测定用。

2.4.2 样品空白试验

除不称取试样外，均按上述测定步骤进行，得到样品空白液。

2.4.3 测定

准确移取0.5 mL样液和同量的样品空白液，分别置于25mL比色管中，加入2.5 mL发色剂。

准确移取乳糖标准工作液0.00，0.20，0.40，0.60，0.80和1.00 mL，分别置于25 mL含2.5 mL发色剂的比色管中。

将样液、样品空白液和乳糖标准液的比色管，塞紧塑料塞，移入沸水浴中。准确加热6 min，取出，用冷水冷却后，用水稀释至25 mL。摇匀后，于波长520 nm处测定吸光度。测定时，乳糖标准液以不添加乳糖标准工作液的空白液调节零点，绘制标准曲线图，样液以样品空白液调节分光光度计零点，测定其吸光度，并从标准曲线图中得出样液中乳糖的含量。

2.5 结果计算

按式(1)计算试样中乳糖含量：

式中：X—试样中乳糖的含量，％;

m₁—测定用样液中乳糖的质量，mg;

m₂—测定用样液相当于样品的质量，mg。

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文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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