1 范围

本标准规定了食用油脂中转基因植物成分实时荧光PCR定性检测方法。

本标准适用于食用油脂中转基因植物成分实时荧光定性PCR检测。

本标准不适用于动物源性油脂中转基因植物成分实时荧光定性PCR检测。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法

GB/T 27025检测和校准实验室能力的通用要求

GB/T 19495.2转基因产品检测实验室技术要求

SN/T 1204植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法

3 术语、定义和缩略语

3.1 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1.1

DNA的提取和纯化DNA extraction and purification

从测试样品的各种成分中释放DNA，随后纯化DNA去除PCR反应抑制剂。

3.1.2

外源基因exogenous gene

利用生物工程技术转入的其他生物基因，使该生物品种表现新的生物学性状。

3.2 缩略语

下列缩略语适用于本文件。

EPSPS(5-enolpyruvylshkimate-3-phosphate synthase gene) : 5-莽草酸-3-磷酸合酶基因

FAM (6-carboxyf luorescein) : 6-羧基荧光素

NOS(terminator of nopaline synthase gene)胭脂碱合酶基因终止子

TAMRA(carboxy-tetramethyl-rhodamine) :羧基四甲基罗丹明

tRNALeu：叶绿体亮氨酸转运核糖核酸基因

4 原理

本标准所涉及食用油脂是油料作物加工产品，通常在常温下为油状液体，在油脂的压榨、抽提过程中，部分核酸等极性组分会随油料作物细胞的破坏而进入油液。采用适当的核酸提取技术，获得适用于实时荧光PCR检测的DNA，通过实时荧光PCR检测其中是否含有各种外源基因，达到对食用油脂中转基因植物成分定性检测的目的。

5 材料与试剂

5.1 设备和材料

5.1.1 高速冷冻离心机(最高转速52000g)。

5.1.2 台式离心机(最高转速15000g)。

5.1.3 冰箱：2℃～8℃、-20℃、-80℃。

5.1.4 制冰机。

5.1.5 超纯水发生器(分子生物学级别)。

5.1.6 双蒸水器。

5.1.7 核酸真空干燥系统。

5.1.8 核酸蛋白分析仪。

5.1.9 实时荧光PCR仪。

5.1.10 离心管：1.5 mL、2 mL、15 mL、50 mL。

5.1.11 电泳仪。

5.1.12 电热恒温干燥设备或其他快速干燥设备。

5.1.13 表面皿：15cm～20cm。

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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