1 范围

本标准规定了蜂王浆中四环素类抗生素残留的放射受体分析(Charm Ⅱ)方法。

本标准适用于蜂王浆中四环素、金霉素、土霉素、强力霉素抗生素残留总量的测定。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

3 方法提要

放射受体分析(Charm Ⅱ)方法的基础是药物功能团与微生物受体位点的结合反应，这些位点与某一类种抗生素的共有功能团相关。应用受体的这种特异性可以实现对某一类抗生素的多残留分析。本方法中，样品中残留的四环素类药物经提取、稀释后与[³H]标记的金霉素共同竞争结合特异的受体位点。在一定温度下反应后，离心分离，清除未结合的四环素类药物，最后加人闪烁液，测定[³H]衰变发出的β粒子放射性量值，计数cpm(count per minute)。测得的cpm值与样品中四环素类抗生素残留量成反比。

4 试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

4.1 四环素类检测试剂盒：

4.1.1 组织阴性对照浓缩干粉：组织阴性对照浓缩干粉储存于2℃～6℃。

4.1.2 MSU多抗标准品浓缩干粉：浓缩干粉储存于2℃～6℃。

4.1.3 组织萃取缓冲溶液(MSU萃取缓冲溶液)干粉：储存于2℃～6℃。

4.1.4 M2缓冲溶液干粉：用于调节pH值，储存于2℃～6℃。

4.1.5 四环素类受体药片：白色，-15℃以下的条件保存。

4.1.6 四环素类氚标记药片：橙色，-15℃以下的条件保存。

4.2 组织阴性对照溶液：使用时取组织阴性对照浓缩干粉(4.1.1)按试剂盒说明书配制成阴性对照溶液。配制好的溶液可在2℃～6℃冰箱或冰浴中保存48 h。如长时间不用，可将溶液保存于-15℃以下的冰箱中，使用时将其解冻。再解冻的溶液在2℃～6℃冰箱中可保存24 h。

4.3 MSU多抗标准溶液：使用时取浓缩干粉(4.1.2)按试剂盒说明书配制成多抗生素标准溶液。溶液的保存方法同4.2。

4.4 组织萃取缓冲溶液(MSU萃取缓冲溶液)：使用时取浓缩干粉(4.1.3 )按试剂盒说明书配制成组织萃取缓冲液。可在2℃～6℃下保存2个月。

4.5 M2缓冲溶液：使用时取浓缩干粉(4.1.4)按试剂盒说明书配制成组织萃取缓冲液。可在2℃～6℃下保存2个月。

4.6 Optif luorR闪烁液。

4.7 阴性对照液：取2 mL组织阴性对照溶液(4.2)，加至6 mL组织萃取缓冲溶液(4.4)中制成阴性对照液，在室温下混匀，该对照液可在室温下保持6h以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。

4.8 阳性对照液：取0.3 mL多抗标准溶液(4.3)，加至15 mL组织阴性对照溶液中(5.2) ,混匀；然后从中取0.3 mL混合溶液加入到6 mL MSU萃取缓冲溶液(4.4)中制成阳性对照液(金霉素浓度4 ng/mL)；在室温下混合均匀。该对照液可在室温下保持6h以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。

4.9 50％甲醇水溶液(1+1，体积比):100 mL甲醇溶解于100 mL水。

4.10 氢氧化钠溶液(1 mol/L) : 40g氢氧化钠溶解于1 000 mL水。

4.11 pH试纸：范围5～10。

4.12 空白基样：选取确认不含有四环素族抗生素的蜂王浆，作为空白基样，用于测定当次批次试剂盒的控制点使用。

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。