北京普天同创生物科技有限公司

  • CNAS实验室认可证书
  • 标准物质定级证书
  • 豫南检测资质认定证书
  • 质量管理体系认证证书
  • 农产品资质证书
  • 伟业计量高企认证证书
  • 中国计量测试学会合作单位
新闻
  • 产品
  • 仪器
  • 新闻
  • 帖子
  • 课堂

在线客服

玉米赤霉烯酮概述及检测方法

发布时间:2014-10-21 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2314

一、概述

玉米赤霉烯酮又称F2毒素,是由镰刀菌、三线镰刀菌、尖孢镰刀菌、黄色镰刀菌、串珠镰刀菌、木贼镰刀菌、燕麦镰刀菌、雪腐镰刀菌等菌种产生的有毒代谢产物,是一种雌激素真菌毒素。主要存在于玉米和小麦中,虫害、冷湿气候、收获时机械损伤和储存不当都可以诱发产生玉米赤霉烯酮。玉米赤霉烯酮类毒素包括玉米赤霉烯酮,立玉米赤霉烯醇、4-酰基玉米赤霉烯酮等。玉米赤霉烯酮的化学名为6-(10-羟基喝;氧基-1-碳烯基)-β雷锁酸一内酯,分子式C18H22O5,相对分子量为318。,玉米赤霉烯酮是白色结晶化合物,溶于碱性水溶液、乙醚、苯、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯,微溶于石油醚,不溶于水、二硫化碳和四氯化碳,在紫外线照射下呈蓝绿色。玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性和致癌作用,可引起动物发生雌激素中毒症。

二、检测方法

(一)薄层色谱测定法

1.原理

试样中的玉米赤霉烯酮经提取、净化、浓缩和硅胶G薄层分离后,玉米赤霉烯酮在254nm紫外线下产生蓝色荧光,根据其在薄层上显示荧光与标准比较定量。

2.试剂

无水乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、1mol/L氢氧化钠、磷酸、丙酮、硅胶G、无水硫钠。

玉米赤霉烯酮标准溶液:精密称取3mg玉米赤霉烯酮标准品,加无水乙醇溶解并转入100mL容量瓶中,加无水乙醇至刻度,此标准溶液含玉米赤霉烯酮0.03g/L。吸取此标准溶液1mL,用无水乙醇稀释至10mL,此标准溶液1mL含玉米赤霉烯酮3μg。将此标准溶液置于4℃冰箱备用。

3.仪器

小型粉碎机、电动振荡器、紫外线灯、玻璃板(5cm×20cm)、薄层板涂布器、微量注射器。

4.分析步骤

(1)提取及纯化称取20g粉碎的试样,置于250mL具塞瓶中,加6mL水和100mL乙酸乙酯,振荡lh,用折叠式快速滤纸过滤,量取25mL滤液于75mL蒸发皿中,置水浴上将溶液浓缩至干,再用25mL三氯甲烷分3次溶解残渣,并转移至100mL分液漏斗中,在原蒸发皿中加入10mL1mol/L氢氧化钠溶液,然后用滴管沿分液漏斗管壁离三氯甲烷层1~2cm处加入1mol/L氢氧化钠溶液,并轻轻转5次,防止乳化,静置分层后,将三氯甲烷层转移至第2个100rnL分液漏斗中,再慢慢加入10mL,1mol/L氢氧化钠溶液,轻轻旋转5次,弃去三氯甲烷层,将第2个分液漏斗中的氢氧化钠溶液合并人第一个分液漏斗中,用少许蒸馏水淋洗第2个分液漏斗,洗液倒入第1个分液漏斗中,加入5mL三氯甲烷,轻轻振摇,弃去三氯甲烷层,再用5H止三氯甲烷重复振摇提取一次,弃去三氯甲烷层。在氢氧化钠溶液中加入6mL 1.33mol/L磷酸溶液后,再用0.67mol/L磷酸调节pH至9.5,于分液漏斗中加入15mL三氯甲烷,振摇20~30次,将三氯甲烷层经盛有约5g无水硫酸钠的定量慢速滤纸,滤于75mL蒸发皿中,最后用少量三氯甲烷淋洗滤器,洗液合并于蒸发皿中,将蒸发皿置水浴上通风蒸干。待冷却后在冰浴上准确加入丙酮1mL,充分混合,用滴管将溶液转移至具塞小瓶中,供薄层点样用。

(2)薄层色谱

①薄层板的制备 称取3g硅胶G,加7~8mL蒸馏水,研磨至糊状后,立即倒人涂布器内,推成5cm×20cm薄层板三块,室温干燥后在105℃活化lh,取出放于燥器中备用。

②展开剂 三氯甲烷-甲醇(95:5)15mL.或甲苯一乙酸一甲酸(6:3:1)15mL任选一种。

③点样 在距薄层板下端2.5cm的基线上用10μg微量注射器滴加试样液三点:滴1点为标准液10μL,滴2点为试样提取液30μL,滴3点为试样提取液30μL加标准液10μL,滴加时可用吹风机冷风边吹边加,点1滴吹干后再继续滴加。

④展开在展开槽中倒入展开剂,将薄层板浸入溶剂中,展至10cm,取出挥干。

⑤观察与评定 薄层板置短波紫外线(254nm)下观察,样液点处于标准点相近位置上未出现蓝绿色荧光点,则试样中玉米赤霉烯酮的含量在方法灵敏度50g/kg以下;若出现荧光点的强度与标准点的最低检出量的荧光强度相等,而且此荧光点与加入内标的荧光点重叠,则试样中玉米赤霉烯酮的含量为50μg/kg;若出现荧光点的强度比标准点的最低检出量强,则根据其荧光强度估计减少滴加的体积(μL),或将样液稀释后再滴加不同的体积(μL),直至样液的荧光强度与最低检出量的荧光强度一致为止。

评论

登录后才可以评论

立即登录
分享到微信
关闭
普天同创
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如18601949136,010-58103629

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听